毛细管电泳在多重 PCR 分析中的应用

2017-06-30 10:57杭州厚泽生物科技有限公司

多重 PCR（multiplex PCR）是在普通 PCR 的基础上加以改进，于一个 PCR 反应体系中加入多对特异性引物，针对多个 DNA 模板或统一模板的不同区域扩增多个目的片段的 PCR 技术。由于多重 PCR 同时扩增多个目的基因，具有节省时间、降低成本、提高效率的优点，所以一经提出，发展迅速，多重 PCR 已经成为一项成熟而重要的研究手段。多重 PCR 技术在生命科学研究中应用广泛，可应用于病原微生物的检测与鉴别、基因诊断、肿瘤的诊断与研究、微卫星等方面。影响成败的主要技术因素有目的片段选择、引物设计、复性温度和时间、延伸温度和时间、各反应成分用量等，而成功的扩增之后的检测分析也是重要的一步。某些多重 PCR 系统，特别是那些鉴别点突变或其他微小变化的系统，其 PCR 产物除琼脂糖凝胶电泳外，还需要进一步分析。许多已建立的单个 PCR 产物分析技术可以直接应用于多重 PCR 分析，如限制性内切酶消化、放射性探针杂交、毛细管电泳和单链构象多态性 (SSCP) 分析都可以用来做多重 PCR 产物的常规分析。毛细管电泳技术分辨率高、灵敏度好、操作全自动化等特点使得其在多重 PCR 产物分析中的应用尤为普遍。近几年由台湾光鼎公司开发的 Qsep100 毛细管电泳仪，由于其操作简便、成本低廉、速度快等特点受到广大科研工作者的喜爱。依靠良好的实验设计或配合市场上成熟的试剂盒，Qsep100 仅需常规的 PCR 扩增引物（无需荧光标记），便可为您轻松实现食源性致病菌检测、消化道感染病原体、呼吸道病原体、传染病检测等多种致病菌的快速筛查与检测。采用专利的即用型笔式预制胶卡夹，高灵敏度 PMT 检测器检测，免去了繁琐、耗时的制胶、点样、拍照等步骤。最佳分辨率可达 1-4bp，1-96 个样本灵活上样，数据分析简便灵活，可挑选任意结果进行统一分析。配套使用以下多种多重检测试剂，并可兼容分析业界各类多重 PCR 试剂：

常见食源性致病菌多重 PCR 检测试剂

五种致泻性大肠埃希氏菌多重 PCR 检测试剂

发热呼吸道病原体多重 PCR 检测试剂

突发传染病多重 PCR 检测试剂

肉及肉制品动物源性成分检测试剂

耐药检测试剂

其他多重核酸扩增检测应用可根据客户需要开发，提供技术支持

下图展示了操作程序及常见图谱：Qsep100 全自动核酸蛋白分析系统也广泛用于 AFLP（amplified fragment length polymorphism，扩增片段长度多态性）/RFLP、SSR、NGS 质控、常规 PCR 产物检测等研究。图示 Qsep100 简便操作：常见多重检测结果图谱：