概述/主要特征
N-STORM 是一种随机光学重构显微镜（STORM），可使在 X、Y、Z 三个方向上的分辨率提升十倍。它通过精确定位荧光样本中单个荧光团的信息，来重建超分辨率的荧光图像。N-STORM 利用尼康强大的 Ti2-E 倒置显微镜，在 XYZ 三维方向上应用高精确度的多色定位和重建技术，使成像分辨率达到传统光学显微镜的十倍（xy方向约20nm）。这种强大的技术可以用于观察纳米水平分子间的相互作用，开拓了科学认知的新世界。

主要特性
N-STORM 可使轴向分辨率提高十倍，达到50nm，相比传统显微镜，除了横向超分辨的提高之外，N-STORM 还利用独特技术使轴向分辨率增加十倍，并提供样本的纳米水平3D 信息。3D-Stack 功能支持拍摄不同Z 位置的多个3DSTORM成像，并将其拼接成一个图像，以创建更厚的STORM图像。

3D和多色成像
N-STORM 利用视野中上千个单个荧光团的高精度定位信息来创建“超分辨”图像，其空间分辨力是传统光学显微镜的10倍。新开发的光学和照明系统针对sCMOS技术进行了优化，图像采集速度提高了10倍。随着采集时间从几分钟减少到几秒，可以捕获活体样本的动态事件，且达到分子水平分辨率。多色超分辨成像有两种方式实现：基于活化基团/报告基团染料对的顺序激活成像和无需活化基团标记的连续激活成像。这种灵活性使用户可以轻松捕获分子水平上多种蛋白质的定位和相互作用特性，获得关键见解。

图像清晰度和密度
新开发的激发光学部件和改进的图像采集速度增加了分子定位密度，从而获得更清晰的大分子结构图像。在同等的时间内，超分辨图像质量得到了明显的提升。

视野和成像
新开发的成像系统中的中间变倍透镜对大视野成像进行了优化。宽视图模式可实现80μmx80μm的图像采集，比之前的成像面积增加了4倍。

系统组合和配置
N-STORM 可与共聚焦显微镜同时组合使用。用户可以在低放大率/大视野的共聚焦图像中指定样本中的期望位置，并通过简单地切换成像方式获得超分辨图像。将共聚焦显微镜与超分辨系统组合，可以为获取的超分辨图像提供整体样品的背景信息。硬件配置可量身定制，提供全自动或简单的电动化TIRF照明器、最新的sCMOS相机或久经考验的EMCCD相机。

物镜
N-STORM 专属的硅油物镜使用高粘度硅油作为浸没液体，其折射率接近活细胞的折射率。由于这种改进的折射率兼容性，当在样品中深处进行超分辨率成像时，这些物镜提高光子收集能力和分辨率。它们在宽波长范围内表现出优异的色差校正和高透射率。

原理结构和体结构
结构化照明显微镜的原理随机光学重建术（STORM）通过整合单个荧光团在三维和多色成像上的高精度定位来重建超分辨率图像。N-STORM 使用非常低强度的光来随机激活相对少量的荧光基团。

荧光基团的随机“激活”支持单个分子的时间分离，使得能够在XY中对每个荧光基团图像进行高精度高斯拟合。

通过使用特殊的3D-STORM光学系统，N-STORM还可以高精度地沿Z轴定位各个分子。结合三维的分子坐标，用户可以得到超分辨率的3D图像。

高精度Z轴位置检测使用在X或Y方向上不对称地聚光光束的柱面透镜，用户能以约50nm的精度定位Z轴分子位置。通过检测在X或Y方向上的像散引起的拉伸的方向和非焦面图像的尺寸来确定Z轴的位置。

将确定的Z轴位置信息与XY轴位置信息整合，即可重建3D荧光图像。满足高精度定位的各类光控探针和标记方式多种活化基团-报告基团染料对以及不含活化基团的标记方式均可使用。

活化基团-报告基团染料对的方式是通过在不同通道之间使用相同的报告染料，以确保得到一致的定位精度。每个染料对由活化染料和报告染料组成。活化染料调节报告染料的激活状态。

不含活化基团的标记仅由成像染料组成，只需简单的样本标记和制备技术即可，例如使用常规染料藕联抗体的传统间接免疫荧光法。