优化的GlycoWorks HILIC SPE流程用于mAb型样品中N-糖的定量与稳定回收

应用领域:蛋白/抗体/蛋白质组

检测样品:mAb

检测项目:N-糖

方案摘要

据估计,所有蛋白质中有一半以上都经过糖基化1,2。这一翻译后修饰 涉及寡糖的连接,其在许多生物过程中发挥着重要作用3 。治疗性抗体 是一类受糖基化影响突出的蛋白质,此类抗体中多聚糖图谱的改变可 能导致其效能和免疫原性出现明显降低。因此,治疗性抗体的多聚糖 图谱在细胞系选育过程中通常被作为关键性质量属性(CQA)进行评估, 并且在开发和批量放行过程中必须进行监测。 

一套用于评价糖蛋白中N-糖的高效分析平台包括:通过PNGase F释放出 多聚糖,采用具有荧光活性的2-氨基苯甲酰胺(2-AB)进行标记,然后采 用亲水作用色谱法(HILIC)进行分离,最后由荧光检测器(FLR)进行检测。

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