——贝克曼库尔特公司在2011大连色谱会推出CESI 8000
【导语】在各种omics、系统生物学成为寻找新一代治疗药物的基本研究思路后，质谱被推上了历史的舞台。在这类研究中，以纳升/分钟（nL/min）的流速和质谱高效地联用是关键。若干年前，CE-MS被nanoLC-MS技术抛在了后面，因为CE鞘液的稀释导致其连接的质谱屈尊降到了让人难以接受的、紫外的灵敏度。作为毛细管电泳技术的先驱，贝克曼库尔特卧薪尝胆、历经5年推出了无需鞘液的OptiMS技术，今日在大连色谱会上隆重推出了应用OptiMS的CESI 8000毛细管电泳，并列举了在CE-MS联用上，令人难以置信的1000倍以上的灵敏度提升、蛋白鉴定的高覆盖率、鉴定翻译后修饰的超高能力。
接下来，小编带您一起来了解这些科学家的工作吧；他们的工作，是最好的证明！
2011年10月10日，贝克曼库尔特公司无鞘液毛细管电泳质谱联用系统CESI 8000产品发布会在大连世界博览广场第五会议室隆重召开。来自国内外色谱、质谱等分离分析领域的100余专家学者们参加了此次发布会。来自奥地利Innsbruck医学院生物中心临床生物化学部的Herbert Lindner教授做了精彩的报告，详细比较了贝克曼新型CESI-MS和nanoLC-ESI-MS在鉴定多肽方面的性能。Lindner的同事Bettina Sarg博士介绍了用新型CESI-MS分析鉴定蛋白翻译后修饰位点的成果。
发布会现场
新型CESI 8000毛细管电泳
技术回顾：无鞘液的OptiMS
作为毛细管电泳技术的先驱，贝克曼库尔特公司潜心5年研发了新型的CESI 8000毛细管电泳仪，特别适用于蛋白质组学研究中的CE-MS分离分析。它采用无鞘液式CE-MS联接技术，将分离毛细管的出口部分腐蚀成多孔材料，多孔材料的外面由导电液体所包裹，导电液体与毛细管出口处的电极接触，为毛细管电泳的正常分离提供电压，也同时提供质谱离子化电压的加载。 由于该项技术的采用，使得CE-MS灵敏度提高1000倍以上，并超过现有LC-MS灵敏度1-2个数量级，是目前灵敏度最高的CE-MS系统。同时此项创新技术能够很好地解决LC-MS技术对高极性物质分离效果不佳的问题。
传统鞘液设计的CE-MS接口
新型OptiMS接口
CESI-MS vs nanoLC-MS技术：鉴定组学中的多肽
奥地利Innsbruck医学院生物中心临床生物化学部的Herbert Lindner教授
题目：CESI-MS，a New Technology for the Identification of Peptides: Comparison with nanoLC-ESI-MS
Linder教授报告
Lindner教授介绍了CE-MS用于蛋白质组学研究的挑战。相比基于色谱柱分离的nanoLC-MS技术，CE-MS有以下优点：（1）更高的效率；（2）更低的流速，可能具有更高的灵敏度；（3）没有梯度效应；（4）不需要柱平衡时间，即分析时间可能更短；（5）较少的交叉污染（carryover），即不需要考虑洗针，分析时间可能更短；（6）和HPLC有不同的分离机理，依赖于电荷而不是憎水性；（7）使用和HPLC不同的仪器系统，不需要换泵。同时，CE-MS潜在会有以下缺点：（1）载样量有限；（2）涂层的稳定性；（3）需考虑涂层和分析物的反应；（4）堵塞。
所以，CE-MS系统的耐用性（robustness）非常重要。
Lindner教授介绍了自己在前几年用毛细管区带电泳（CZE）对大鼠睾丸的天然H1组蛋白（histone）进行分析的结果。
接下来，他主要对比了新型CE-MS和LC-MS的结果。使用的样品包括：血管紧张素Angiotensin1和2的多肽标准品；大鼠睾丸连接器组蛋白（Rat Testis Linker Histones）；人类肿瘤细胞中的连接器组蛋白；过乙酰化核心组蛋白（Hyperacetylated Core Histones），用Arg-C酶解，比较新型CE-MS和LC-MS的结果（LC-MS采用nanoLC）。
OptiMS Silica Surface Capillary Cartridge
首先，用甲酸作BGE分析了血管紧张素Angiotensin 1和2的多肽标准品，条件为：样品浓度75fmol/uL，样品总量300amol，进样4uL，BGE为0.1％甲酸pH2.7，涂层为polyethyleneimine silane，E=250V/cm，ESI电压为1.7kV。结果的灵敏度S/N分别为：Ang-1 ：203，Ang-2：94。然后其余条件不变，改变进样量为0.18~0.75 nL，即样品总量为14~57 amol，在最低的0.18nL进样量下，提取离子流图（XIC）仍可获得很好的灵敏度，Ang-1：13.9 amol, S/N=84.8，Ang-2：17.2 amol，S/N=34.3。
然后，在比较了多种毛细管涂层后，选择了M7C4l。其中CE-MS的实验条件为：进样7.7nL，样品总量为300fmol， BGE为0.1％甲酸pH2.7，涂层为M7C4l，E=250V/cm，ESI电压为1.7kV。
比较CESI-MS（300fmol样品）、LC-MS（300fmol）、LC-MS（3.0 pmol）水平的样品检测结果，CESI-MS的出峰时间较快，12.83min即出完，而nanoLC-MS需要46.03min，但CE-MS的分辨率却非常好。从鉴定的多肽数目来看，CE-MS鉴定了135个H1组蛋白肽，48个非组蛋白肽，而LC-MS（300fmol）的相应两个数字是：79个/30个，LC-MS（3.0 pmol）为129个/74个，可看到CE-MS的灵敏度明显高（基本相当于3.0 pmol的LC-MS结果，即灵敏度比LC-MS高10倍）。在对7种组蛋白的鉴定序列覆盖率的比较中，也看出CE-MS的结果要明显优于LC-MS。
三种不同条件下的CE-和LC-MS分析
从H1组蛋白肽的鉴定上来看，CE-MS（300fmol）比较LC-MS（3pmol），两者共同鉴定的是78个，仅有CE-MS鉴定的是57个，仅有LC-MS鉴定的是51个。事实说明，CE-MS不仅提高了灵敏度，而且成为LC-MS鉴定的有力补充，使用两种技术后，鉴定的数目从129个增加到了186个（51＋78＋57）。
被鉴定出的肽（300 fmol CE-ESI-MS和3.0 pmol LC-ESI-MS）
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