注意事项
1、实验前请仔细阅读说明书，规范操作。 2、本品各组成成分均不得与其他产品或不同批号产品中的相应组成成分进行混用。 3、基因变异可能会导致假阴性结果。 4、实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染都可能会造成假阳性结果。 5、恰当处理实验过程中的废弃物和扩增产物。
检测步骤
1、样品处理
1）取样品100g（mL），加入到含有900mL预热到44℃ BPW的无菌容器中均质，调节pH至6.8±0.2。
2）36±1℃培养18-24h。
注：也可参考其他地方标准进行样品的前处理。
2、核酸提取
1）取40μL增菌液于裂解液管中，98℃或沸水浴10min。
2）冷却至室温，吸取上清备用或者置于-20℃保存。
3、反应体系配置
从试剂盒中取出SALES预混液，充分融化，短暂离心，然后将阴性对照、样品的DNA提取液、阳性对照各取5μL分别加入PCR管中，盖好管盖，短暂离心，立即进行PCR扩增反应。
4、PCR扩增
PCR管置于PCR仪上，推荐反应程序设定如下：反应体系为25μL，在第二步每个循环60℃时检测荧光信号，检测通道选择FAM、HEX（VIC）。
第一步 | 第二步 | ||
1次 | 45个循环 | ||
95℃ | 95℃ | 60℃√ | 72℃ |
5min | 15s | 30s√ | 30s |
注 ：使用ABI系列PCR仪器，如果不添加ROX，“passive reference”和 “quencher”均选择“none”。
概述
采用实时荧光PCR技术，针对沙门氏菌和阪崎肠杆菌特异性基因设计引物和探针。PCR扩增过程中，与模板结合的探针被Taq酶分解产生荧光信号，荧光定量PCR仪根据检测到的荧光信号绘制出实时扩增曲线，从而实现沙门氏菌和阪崎肠杆菌在核酸水平上的定性检测。
检测项目：细菌/真菌
适用样本：原料、食品、水样、环境等
规格
96T/盒
