存活分析试剂盒

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存活分析试剂盒

1.LIVE/DEAD® 存活/细胞毒性试剂盒
LIVE/DEAD® 存活/细胞毒性试剂盒提供了一种极其简单的基于荧光的分析方法,可用于测定贴壁或非贴壁细胞的存活以及细胞毒性。该试剂盒包括两个探针:钙黄绿素 AM 和乙啶同型二聚体-1(EthD-1)。钙黄绿素 AM 是一种荧光酯酶底物,水解后生成可发出绿色荧光的产物 (钙黄绿素);因此,绿色荧光是具有酯酶活性和完整细胞膜 (可保留酯酶产物) 细胞的指示剂。乙啶同型二聚体-1 是一
种可发出红色荧光的高亲和核酸染料,它只能通过死细胞受损的细胞膜。采用配有标准荧光素长通滤光片组的荧光显微镜以及流式细胞仪或荧光计检测荧光 。LIVE/DEAD® 存活/细胞毒性试剂盒使用方便、可靠且成本较低,是一种经济的分析方法,适用于细胞毒性药物的高通量筛选。

2.LIVE/DEAD® 细胞活力分析试剂盒
LIVE/DEAD® 细胞活力分析试剂盒可利用简单的双色荧光分析,区分出代谢活跃细胞和损伤细胞及死细胞。该分析方法的原理是:代谢活跃的细胞可以将 C12-刃天青 (C12-resazurin) 还原为可发出红
色荧光的 C12-试卤灵 (C12-resorufin),而细胞质膜受损的细胞 (通常为晚期凋亡和坏死细胞) 可以摄入细胞不通透性 SYTOX® Green核酸染料。因此死细胞主要发出绿色荧光,而健康的代谢活跃细
胞则主要发出红色荧光。受损细胞的代谢活性较低,因此发出的红色荧光强度较低 。由于受损细胞拥有完整的细胞膜,因此几乎无 SYTOX® Green 染料积聚,因此其发出的绿色荧光强度亦极低。LIVE/DEAD® 细胞活力分析试剂盒包括亲脂性的 C12-刃天青,它更容易透过活细胞,当其被还原为 C12-试卤灵时,它的保留能力远优于非亲脂性的试卤灵。上述特性使其在流式细胞分析过程中可以获得更亮的信号和更好的检出灵敏度。

3.LIVE/DEAD® 细胞介导的细胞毒性试剂盒
LIVE/DEAD® 细胞介导的细胞毒性试剂盒适用于长期的细胞毒性评估,而细胞质标志物 (如钙黄绿素,calcein) 使用时间过长则可能渗出或被隔离出来。该试剂盒直接采用了 Kroesen 及其同事开发
的步骤,利用荧光显微镜检测自然杀伤 (NK) 细胞介导、淋巴因子激活的杀伤 (LAK) 细胞介导和 T 细胞介导的细胞毒性。它还适用于 NK 细胞的活性的快速流式细胞分析。



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