阪崎肠杆菌显色培养基ChromogenicEnterbacterSakazakiiAgar)

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上海楚柏实验室设备有限公司

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上海楚柏Truelab是广东环凯微生物产品和水质检测产品的上海区域代理商。CRM006阪崎肠杆菌显色培养基Chromogenic Enterbacter Sakazakii Agar)供婴儿奶粉以及其它食品中阪崎肠杆菌的鉴定和计数。(GB4789.40-2010和SN/T 1632-2005,ISO标准)

 

原理:

蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;胆盐抑制革兰氏阳性菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生;显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚--D 葡萄糖苷与阪崎肠杆菌中的α-葡萄糖苷酶发生反应,水解底物,释放出5-溴-4-氯-3-吲哚基显色基团,在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。

 

配方(每升):

          胰蛋白胨                           15g

          大豆蛋白胨                         5g

          氯化钠                             5g

          柠檬酸铁铵                        1g

          脱氧胆酸钠                         1g

          硫代硫酸钠                         1g

          5-溴-4-氯-3-吲哚--D 葡萄糖苷      0.1g

          琼脂                               15g

          最终pH 7.3±0.2

 

使用方法:

1. 取瓶内干粉43.1克,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min;冷却至50℃,摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。

2. 取样品333克按MPN三管法分别取100克、10克和1克分装在各三个2000ml、250ml和100ml的三角瓶中,在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水或缓冲蛋白胨水,摇匀,在36℃培养18-22小时(SN和FDA方法)。

3. 各取10ml上述悬浮液加到装有90mlEE肉汤(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中,在36℃/44℃增菌培养18-22小时。

4. 用划线或涂布法把混匀的肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上,35-37℃培养18-24小时。 5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。

质量控制:本品倾注平皿后呈淡黄色,下列菌株接种后36±1℃培养18-24小时生长情况如下表:









































 

质量控制

 

 

 

质控菌株

接种量

(cfu/平板)

生长情况

菌落色泽

阪崎肠杆菌ATCC51329

30 – 300

良好

绿-蓝绿色

普通变型杆菌HK7132

30 – 300

良好

灰黑色

粘质沙雷伯氏菌HK7121       

5000

不长


粪肠球菌ATCC29212

5000

不长


 

贮存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

规格:可配置1L的培养基干粉。

 

参考文献:

1.GB/T4789.40-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验

2.GB 4789.40-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验 阪崎肠杆菌检验

3.SN/T 1632.1-2005 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 第1部分 分离与计数方法

4. SN/T 1632.2-2005 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 第2部分 PCR方法

5.ISO22964-2006 Milk and milk products-----Detection of Enterobacter sakazakii

 

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