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植物与我们的生活息息相关,五谷杂粮满足每日饮食所需,棉麻织物让我们远离严寒。而从植物组织中进行高质量的RNA提取是分子生物学实验的必要前提,如cDNA文库的构建、荧光定量PCR检测、Northern杂交、原位杂交等。从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究的关键所在。
【植物样本RNA提取棘手问题】 许多植物组织特别是植物的果实(例如苹果、樱桃、李子、葡萄等)和树木类植物中富含酚类化合物。多酚是植物细胞中的一类次级代谢物,因其具有多个酚基团而得名,种类繁多,结构各异,含量仅次于纤维素【1】。在植物材料匀浆时,多酚易被氧化形成醌类物质与RNA不可逆的结合,导致提取的RNA纯度降低,影响后续的分子实验进行【2】。 多糖的污染是提取植物RNA时常遇到的另一个棘手的问题。植物组织中往往富含多糖,而多糖的许多理化性质与RNA很相似,因此很难将它们分开。在去除多糖的同时RNA也易被裹携走,造成RNA产量的减少;而在沉淀RNA时,会产生多糖的凝胶状沉淀,这种含有多糖的RNA沉淀难溶于水,或溶解后产生粘稠状的溶液【3】。由于多糖可以抑制许多酶的活性,因此污染了多糖的RNA样品无法用于进一步的分子生物学研究【4】。 【FastRNATM Win Kit for Plant】 如何着手解决以上问题呢?MP Biomedicals推出了一款能从植物细胞和组织中分离和纯化高质量总RNA的提取试剂盒——FastRNATM Win Kit for Plant。本款试剂盒采用快速、简便的硅胶柱膜吸附纯化方式,20~30分钟内即可轻松完成提取;内含裂解介质管Z,配合使用FastPrep®仪器能够高效裂解任何植物组织。两种裂解缓冲液,可轻松解决上述多酚和多糖干扰RNA提取的问题。裂解缓冲液中包含的载体材料(mineral carrier material)可通过结合来达到去除DNA的目的,无需额外的DNA酶消化处理步骤。 【轻松解决样本污染烦恼】 1.可轻松快速地从任何植物样品中分离总RNA 彻底且可重复的样品裂解,然后进行有效的结合-洗涤-洗脱纯化过程。 2.可获得高纯度总RNA,获得更好的RT-PCR结果 通过载体材料(mineral carrier material)可有效去除基因组DNA污染。 无需DNase消化处理。 3.可以同时分离蛋白质 4.两种裂解缓冲液:确保完全去除PCR抑制剂 Lysis Solution PS:可特别针对多糖含量高的植物样品。 Lysis Solution PH:优化针对酚含量高的植物样本。 5.无有害试剂成分 6.搭配仪器使用,提升实验效率 针对绝大多数植物样本,搭配使用FastPrep®仪器,可在5min中内完成最高多达48个样本的处理。 【一目了然的操作流程】 【新品订购】 相关文献 【1】宋立江, 狄莹, 石碧. 植物多酚研究与利用的意义及发展趋势[J]. 化学进展, 2000, 12(2):161. 【2】刘芳, 官春云. 富含多酚类植物RNA提取的研究进展[J].作物研究, 2015(1). 【3】李宏,王新力.植物组织RNA提取的难点及对策[J].生物技术通报,1999(1),1:36-39 【4】Fang G , Hammar S , Grumet R . A quick andinexpensive
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