应用领域:生命科学,蛋白/抗体/蛋白质组
检测样品:细胞
检测项目:分离纯化
参考标准:无
1 从LB平板上挑取新活化的大肠杆菌DH5α单菌落,接种到5mL LB培养基中,37℃振荡培养过夜。
2 取1mL培养物接种到100mL LB培养基(250mL三角瓶)中,37℃振荡培养2~3h。 3 将菌液转移到50mL离心管(2管)中,冰上放置15min。 4 4℃ 4000 rpm 离心5min,弃去上清液,倒置使培养液流尽。
5 用20 mL 冷CaCl2溶液悬浮菌体沉淀合并成一管,在4℃ 4000 rpm 离心5min,弃去上清液。
6 用10 mL 冷CaCl2溶液悬浮菌体沉淀,冰浴30min。
7 4℃ 4000 rpm 离心5min,弃去上清液,用2 mL的冷CaCl2溶液悬浮。 8 分装到数个EP管中,每管200 uL,冷冻保存备用。