全柱成像等电聚焦毛细管电泳仪(clEF-WCID)样本

应用领域:

资料类型:样本

方案摘要

  蛋白质的高效分离、pI 点的准确测定和高通量的纯度检测是蛋白质药物和抗体药物质量控制、新药研发和蛋白质组学基础研究的重要课题;在药物工业蛋白质药物候选分子的早期筛选过程,以及早期蛋白质药物制剂和后期药物制剂的研发中,蛋白质分子退化过程产生的电荷异构体产物,例如脱氨基化异构体和琥珀酰亚胺环异构体的产生, 都会差生异常复杂的蛋白质产物。 而且,除上述那些与蛋白质分子稳定性有关的带电荷异构体退化产物外,蛋白质分子本身还带有电荷异构体,如糖化蛋白质、蛋白质翻译后没有切除完全的C终端赖氨酸, 因此所有这些蛋白质本身的电荷异构体都会使得准确表征和定量测定上述退化过程中的电荷异构体变得很复杂。

  电聚焦电泳IEF(isoelectric focusing) 技术是表征蛋白质及其他生物高分子的一种主要方法。在生物制药行业里,IEF已经是一种有30年历史的常规方法,用于生产过程分析、药物制剂研究分析及最终产品的质量控制分析。然而,作为一种重要的蛋白质分析方法, 凝胶介质IEF分析基本上是非自动化的手工操作、分析速度慢、分辨率低、方法优化麻烦、重现性差,而且只能做半定量分析。

  毛细管电泳技术为基础的的IEF方法(capillary isoelectric focusing) - cIEF在1985年被首次报导,是用商品化毛细电泳(capillary electrophoresis,CE) 仪器完成的,称之为单点检测的常规cIEF。常规cIEF的主要问题是聚焦谱带移动过程,在IEF聚焦过程结束时,各蛋白质组份都在毛细管内聚焦形成不移动的窄区段。普通CE仪器的是单点检测方法,用此方式去检测那些不动的蛋白质区段需要有一个聚焦谱带移动的过程: 即通过气压把这些蛋白质区聚焦谱带依次通过毛细管柱上的单点检测点,谱带移动过程导致pI分辨率的显著下降、分离重复性很差、分析时间通常要近一小时。

  综上所述, 凝胶介质等点聚焦电泳(Gel IEF)和传统的毛细管等点聚焦(单点检测cIEF)存在很大局限,分析时间长、重复性差、操作繁琐,不适用于现代蛋白质基础研究和药物工业对高通量检测和高准确度的要求。Advanced Electrophoresis Solutions Ltd (AES) 是一家位于加拿大安大略省的高科技公司,在生命科学和蛋白质化学领域多年不懈努力,其最新推出的新一代毛细管电泳系统:全柱成像毛细管等电聚焦电泳技术(cIEF -WCID), 彻底颠覆了传统电泳技术在蛋白质分析中的定义,通过cIEF-WCID技术,复杂蛋白质的分离和 pI 点的测定变得异常轻松:高分辨率、高效分离、准确 pI 点测定和超高分析通量(见图一和图二),成为蛋白质药物、抗体药物研发、质量控制、蛋白质组学基础研究和生物相互作用机制探索的强有力工具。cIEF-WCID 是电荷耦合装置 (CCD) 成像技术和微分离技术发展到一定高度后的产物,AES利用更为先进的CMOS成像技术对整个微分离通道(长度通常为3-8厘米)内的分离进行成像检测,检测信号可以是紫外吸收、折射指数梯度或激光诱导荧光。

相关产品
店铺 下载
咨询留言 一键拨号