众所周知，亚硝胺是一钟致畸致癌变的物质，导致了从2018以来的100多种化合物的召回，其中就包括阿昔洛韦。阿昔洛韦是一种用于治疗带状疱疹和水痘的抗病毒感染的药品，在市场上应用十分广泛，因而其相关亚硝胺的标准显得十分重要。目前美国FDA已经修改了亚硝胺含量标准，对药品来说目前限度为30ng/g,相当于每日最大剂量为880mg/天。

鉴于亚硝胺在阿昔洛韦中不可避免的存在，其含量的分析也成为研究人员必不可少的工作。本研究中给大家分享一种阿昔洛韦中10种亚硝胺杂质的定量方法。具体信息如下：

样品浓度：40mg/ml

加标样品浓度：40mg/ml，亚硝胺标品25ng/g

液相条件：

色谱柱：Luna® Omega 3.0 µm Polar C18

规格：150x3.0mm

货号：00F-4760-Y0

流动相：

A: 0.1%甲酸水

B: 0.1%甲酸甲醇

梯度：

时间（分钟）	B%
0.00	2
1.00	2
20.0	98
22.0	98
22.1	2
24.0	2

流速：0.45mL/min

上样量：20µL

温度：35°C

检测器：MRM

质谱：SCIEX

MRM条件：

模式：APCI大气压化学电离

离子源温度：350°C

雾化气：45psi

吹帘气：35psi

碰撞活化解离：中等

雾化器电流：3µA

谱图及结果如下：

表1:定量分析结果：校准曲线均在0.025-20ng/mL范围内，相关系数均大于0.99，定量限研究均进行6次重复进样评估。总变异系数（CV）<20%，在定量限水平下，准确度在±20%以内

图1 10种亚硝胺杂质和阿昔洛韦原料药分离谱图

图2 10种亚硝胺杂质的定量校准曲线

图3 定量限下10种亚硝胺杂质谱图

图4 加标后的10种亚硝胺杂质谱图

表2 加标样品的准确度和变异系数

Compound	Accuracy(%)	CV(%)
NDMA	81.5	4.10
NDIPA	87.5	1.90
NMEA	80.5	3.90
NDEA	84.3	3.30
NPYR	82.1	10.4
NPIP	83.9	2.30
NMPA	84.5

领域：结构生物学