“当我们在不同品牌的液相仪器、液相色谱柱或接头之间来回切换时，许多品牌的液相仪器、液相色谱柱或接头形状略有不同，因此将已装配好的接头从一根液相色谱柱转移到另一根液相色谱柱时可能无法实现牢固的连接，由此会导致泄露或死体积出现，而死体积还会带来拖尾、分离度或峰形较差等问题...... ”

三张图告诉你，液相接头“连接”不牢固的后果！

在上图中，中间图片为毛细管伸出密封垫圈部分过长的示例。 因为接头不够紧固， 这可能导致泄漏。  有时这些现象比较明显，它们会快速触发泄漏传感器并中断运行；但有时泄漏非常缓慢，因此难以查明此问题。  尤其是对于有机流动相，溶剂可能在触发泄漏传感器之前蒸发。  

图为尿苷在SEC色谱柱上的色谱（注：尿苷；AdvanceBio SEC 4.6 × 150 mm，300 Å（部件号 PL1580-3301）；150 mmol/L 磷酸盐缓冲液，pH 7.0；0.35 mL/min）

上图展示了毛细管伸出密封垫圈部分过短的情况，在毛细管末端和柱头之间形成了额外空间。  这一死体积或混合腔将会导致拖尾、分离度差或峰形普遍较差。 

我们在这里通过两个示例来说明额外的死体积对分离的影响。  第一个示例为单一蛋白质，额外的死体积导致拖尾因子从 0.901 增加至 1.093。 

第二个示例是在 C18 色谱柱上分离多肽混标，其中峰展宽的影响非常明显，小峰开始消失！ 

图为 C18 色谱柱上分离多肽混标的图片（注：多肽混标 (Sigma H2016)；AdvanceBio 肽谱分析色谱柱 2.1 × 150 mm（部件号 653750-902）；含 0.1％ TFA 的水/乙腈梯度；0.2 mL/min）

为了能够避免液相接头所带来的问题，很多人已经给了一连串的操作提示，比如要选择合适的操作工具，要采用低压接头。可是遇到高压情况怎么办？没有合适的工具又怎么办？

听说只需“一招鲜”液相色谱接头故障就可避免！？

安捷伦的 InfinityLab Quick Connect 快速连接接头，TASIA 奖得主

- 可靠且可重复使用：即使重复连接 200 多次，在 1300 bar (18850 psi) 的压力下也依然能够保持稳定 ;

- 内置弹簧式设计：只需按下压杆，所有类型的 UHPLC 色谱柱即可实现零死体积的连接;

- 密封圈可更换;

- 真正的手紧式连接：无需特殊培训，用户操作方式的差异不会对色谱分析造成影响；

- 连接快速、轻松：节省时间并减少故障。

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标签：液相色谱，快速接头，死体积，拖尾峰