有效延长色谱柱的寿命(下)

2019-5-05 12:14

色谱柱用久后会出现柱压升高,柱效降低,峰形畸变, 保留时间改变等变化,如不采取适当措施,色谱柱将无法再使用。因此选择合适措施延长柱子的使用寿命就显得至关重要了。

正确控制流动相pH

流动相超过规定pH范围将会导致硅胶基质流失或键合相碳链断裂,柱效下降,寿命变短。对色谱柱造成不可逆的伤害,因此必须严格按照说明书规定pH值下使用。

备注:如说明书中未给出可参考第二期内容。

优先选择高品质柱子

不同批次柱子填装时都会有微小差异,所以选用柱子时应选择工艺完善稳定的高品质柱子(如:Waters,KNAUER,Phenomenex等等)来降低这种批间差异,以此保证样品的重现性。

任何柱子在使用过后都会发生变化。尤其在强酸或强碱条件下使用后,柱子更易发生变化。在使用时应尽量选用pH范围宽的柱子(KNAUER C18H柱,pH范围:1-12)。

备注:开发分析方法时,建议使用新柱子。柱子一经使用,柱性会有微小变化,使用旧柱子开发出来的分析方法,很可能在使用新柱子分析时。无法达到预定效果的情况。专柱专用在一定程度上也可以延长柱子寿命。

定期冲洗柱子

柱子在使用一段时间后会有一些杂质累积在柱内。逐渐影响柱子的品质。从而造成出现鬼峰、基线不稳等现象。

ü解决方法:

用洗脱能力较强流动相冲洗,最好是在每次完成样品分析后立刻进行冲洗。如果含有缓冲盐系统﹐使用高比例水置换出缓冲盐,再用100%有机溶剂冲洗10-20倍柱体积(关于常用色谱柱柱体积请查看往期课堂)。

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领域:其他生命科学

标签:色谱柱,寿命,液相

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