色谱柱是HPLC分离过程的核心，针对糖分析，不同的色谱柱直接决定分离的对象、过程和效果。分离糖类常用的色谱柱有：凝胶柱、C18柱（衍生化）、氨基柱和糖分析柱。这些色谱柱分离原理不同，使用的条件也各不相同，在对于糖分析的应用，见下表。

                                                    糖分析色谱柱应用对比

色谱柱	分离原理	常用流动相	方法建立	分析对象
凝胶柱	分子排阻	水/缓冲介质	简单	多糖、高聚糖
氨基柱	HILIC模式（反反相）	乙腈/水	较复杂	单糖、二糖、低聚糖
糖分析柱	配位体交换	高比例水	简单	单糖
C18柱	反相	不限	复杂	单糖

凝胶柱

        样品进入凝胶柱后，在一定孔径的凝胶颗粒中扩散，按照分子筛效应，大分子较快洗脱出小分子较慢洗脱出来。由于这样的分离原理，限制了相同或相近分子量的碳水化合物不能实现很好分离，所以凝胶柱常用于大分子的多糖或者高聚糖的分离检测。

C18柱

        C18柱，实验室最常见色谱柱，价格低廉，使用注意事项少。碳水化合物一般易溶于水，极性较高，所以在C18柱上没有很好的保留。但是可以通过衍生化提高碳水化合物的疏水性，搭配紫外检测器，就可以使用C18柱进行分析检测，适合于痕量分析。

氨基柱

        氨基柱在分析碳水化合物时采用的是HILIC模式，这样的分离模式决定了氨基柱比较适合较小分子糖的分离，可适用于分离同时含有单糖、二糖、三糖等不同聚合度的混合糖分子的样品。氨基柱的键合相氨丙基易水解，所以氨基柱的使用寿命较短，使用注意事项相对较多。酸性或高比例水相条件会加速水解，因此氨基柱应避免在酸性或者高水相的流动相中使用。当样品显酸性的时候，可在流动相中略微添加少许氨来提高氨基柱柱效和寿命。

糖分析柱

        糖分析柱简称糖柱，采用苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为基质，金属离子对为官能团，二者通过磺酸基键合作为填料。分离时，低交联度的树脂允许糖的透过，并且按尺寸大小进行分离表现为尺寸排阻作用，同时碳水化合物上的羟基与树脂的金属对离子形成结合体而被保留，表现为配位体交换作用。由于这种特殊的分离机制决定了糖柱更擅长分析单糖，对于结构复杂、分子量大的碳水化合物分离效果稍差。德国诺尔糖分析柱特殊工艺不仅可以适用于聚合度小于8的糖分析，还可适用于糖醇及有机酸类物的分析检测。糖柱分离条件简单，样品制备工作量小，可直接使用水洗脱，因此糖柱很容易建立分离糖类物质的方法。但是糖柱特殊的基质所以使用时常需要较高柱温（60~80℃），一般液相柱温箱只能达到65℃，而诺尔AZURA系统液相的柱温箱可达到85℃，无需额外配置柱温箱就可达到所需色谱条件进行糖检测，非常简便快速。

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标签：色谱柱，糖分析，单糖，二糖，糖