2022-4-04 01:12
随着生物制药技术的发展，高细胞密度和高产物滴度的细胞培养已经成为一种趋势，这给传统下游澄清工艺带来了越来越大的负担，使得我们传统深层过滤器载量下降，整体纯化效率降低。什么是絮凝技术？絮凝技术，是通过改变pH值或离子环境，诱导小的易堵塞杂质絮凝或沉淀的方法，从而增加杂质颗粒粒径，减少难以通过离心方式分离且会堵塞下游过滤器的微小颗粒，进一步通过Clarisolve®深层过滤器一步澄清，实现高细胞密度料液（>10^7/ml）的高效澄清。絮凝原理示意图：
不同絮凝方式处理后粒径变化：
絮凝方案如何实现? 针对高密度细胞收获液，默克可提供两款GMP级别絮凝剂：pDADMAC和mPAA。二者均为阳离子聚合物，料液可在絮凝剂加入后30分钟内高效完成絮凝过程。
絮凝剂& Clarisolve®深层过滤器：
经过絮凝处理后的料液，颗粒物直径会提高2-4倍，往往会大于传统深层过滤器的截留孔径，容易造成滤器的迅速堵塞，载量降低。Clarisolve® 深层过滤器是首款针对絮凝处理后料液的粒径分布而特别设计的，具有梯度密度结构的澄清滤器。Clarisolve® 深层过滤器示意图
优点：
孔径分布范围大，适用于颗粒粒径范围广的杂质去除
梯度过滤，载量高
单级过滤即可有效降低浊度，减少深层过滤使用面积
对于HCP/DNA 有较高的去除能力
传统澄清过滤 VS 絮凝技术相较于传统深层过滤而言，采用絮凝技术进而进行深层过滤，可达到更高的过滤载量，从而降低深层过滤膜包的使用面积和使用前冲水量。同时，絮凝所需时间在30-60 min，相比于两级深层过滤，大大降低了澄清过滤的时间成本。以2000L生产工艺为例，对两种技术进行对比：
* 细胞密度>20*10^6 cells/mL絮凝剂的残留絮凝剂通常是一类带正电荷高分子聚合物，在抗体纯化的工艺中，每一个步骤都会对絮凝剂有一定去除作用，大部分的絮凝剂会在阳离子层析后被大量去除，在最终制剂前的蛋白料液中，絮凝剂残留量满足毒理要求，经过细胞血红蛋白释放检测，残留的絮凝剂剂量不具有细胞毒性。絮凝剂 pDADMAC 通过层析工艺后的残留：
絮凝剂 mPAA 通过层析工艺后的残留：
絮凝剂毒性反应对比：
随着上游培养技术的迅速发展，高密度细胞培养将成为趋势，在这种情况下，采用传统深层过滤会迅速堵塞，造成澄清工艺的载量大幅度降低。而采用絮凝技术，则能够有效地解决澄清滤器低载量的挑战，与此同时，对 HCP 和 DNA有更好的去除能力。如需咨询产品信息，请点击此处。如您正在研发新冠病毒药物，请点击此处填写问卷调查。我们会第一时间为您提供新冠药物开发所涉及的产品技术与服务组合，及全球专家的优先支持。帮助您快速到达临床，取得战「疫」的胜利。新冠病毒药物研发默克联系人：史秋明博士 客户技术应用总监联系方式：miles.shi@merckgroup.com我们也将给您配备一对一的技术咨询专家。
领域：生物制药/仿制药,疫苗
