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日立高新应对培养基中含二肽(丙氨酰谷氨酰胺)氨基酸的测定

1970-01-01 08:00日立高新技术公司

 

        细胞培养所必需的L-谷氨酰胺在水溶液中性质不稳定,分解后会生成对细胞有害的氨。已知氨能够抑制细胞的生长及目标物的生成,于是人们开始使用L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(丙氨酰谷氨酰胺、Ala-GluNH2)来代替L-谷氨酰胺。丙氨酰谷氨酰胺是L-丙氨酸和L-谷氨酰胺缩合而成的二肽,在水溶液中的稳定性高,不易生成氨,因此可以进行更长时间的培养。         在此,我们将介绍使用L-8900型高速全自动氨基酸分析仪,对包括丙氨酰谷氨酰胺在内的42个氨基酸成分进行测定的例子。本例中,我们分别采取生理体液分析和高分离度生理体液分析双柱联用方式进行了测定,同时还将介绍添加了丙氨酰谷氨酰胺的培养基测定例。   ■标准样品与培养基的测定例(使用生理体液分析柱)   分析条件  

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氨基酸标准溶液测定例

 

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氨基酸标准溶液测定例(各2 nmol/20 μL(部分成分除外))   

样品前处理  

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  添加了Ala-GluNH2的培养基的测定例

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添加了Ala-GluNH2的培养基的测定例(前处理后进样20 μL)

        使用生理体液分析柱对42个氨基酸成分进行了测定。在标准分析方法中,Ala-GluNH2的出峰位置与Cys重叠,但对梯度程序进行了优化后,便可以分离出Ala-GluNH2的峰,从而可以与其他氨基酸一样对该二肽进行定性和定量分析。   ■标准样品与培养基的测定例(高分离度生理体液分析双柱联用)   分析条件  

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  氨基酸标准溶液测定例

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氨基酸标准溶液测定例(各2 nmol/20 μL(部分成分除外))   样品前处理   20139229430.jpg  

  添加了Ala-GluNH2的培养基的测定例

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添加了Ala-GluNH2的培养基的测定例(前处理后进样20 μL)

        如果采用高分离度生理体液分析双柱联用,可以进行更高分离度的测定。由于双柱联用可以通过将两根色谱柱串联的结构对压力进行分散,因此能够实现高速、高分离度的分析。这样不仅可以完全分离Val 和Ala-GluNH2,而且还能够改善中间洗脱出的Ile、Leu、Tyr的峰形,实现更高精度的定量分析。 氨基酸成分名列表

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关于日立高新技术公司:

  日立高新技术公司是一家全球雇员超过10,000人,有百余处经营网点的跨国公司。企业发展目标是“成为独步全球的高新技术和解决方案提供商”,即兼有掌握最先进技术水准的开发、设计、制造能力和满足企业不同需求的解决方案提供商身份的综合性高新技术公司。日立高新技术公司的生命科学系统本部,通过提供高端的科学仪器,提高了分析技术和工作效率,有力推进了生命科学领域的研究开发。我们衷心地希望通过所有的努力,为实现人类光明的未来贡献力量。   更多信息请关注日立高新技术公司网站:http://www.hitachi-hitec.cn

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TAG: 氨基酸
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