文章结构
1. 上期内容小结
2. 案例一：利马前列腺素
3. 案例二：神经毒素BMAA
4. 案例三： 类固醇类激素
5. 关于SelexION技术的总结
上期内容小结
在上期内容中, 大家已了解了SelexION®如何工作来提高选择性；同时也了解了环肽LC-DMS-MIM测定方法提高定量选择性和灵敏度的应用，以及DMS如何对新型抗癌光敏剂“福大赛因”的同分异构体有效分离提高分离度和测定准确性的案例。今天是上期内容的姊妹篇，主要介绍DMS如何降低内源性干扰和高本底噪音，提高定量选择性和灵敏度。
本期内容
案例一 利马前列腺素
利马前列腺素，是前列腺素E1的类似物，临床给药量低，对方法灵敏度要求很高。同时，利马前列腺素本身为PGE1类似物，人血浆中含有内源性的PGE1及其它多种结构类似物甚至同分异构体，这些内源性干扰成分造成了多杂峰干扰和高本底噪音的问题。但单纯通过样品前处理和色谱分离无法消除这些干扰。作者Chao[1]描述：原来的方法使用2D-LC, 检测时间长(>50 mins)，无法满足临床药代的通量要求。Chao使用LC-DMS-MS/MS方式，不但DMS成功消除干扰，提高了利马检测的信噪比，同时也无需使用2D-LC来提高分离，成功将检测时间缩短为15min。见图1。
图1. Chao[1]展示的人血浆空白及不同浓度的利马前列腺测定结果；结果展示：DMS很好的排除了内源性前列腺素系列化合物的干扰，降低了本底噪音。
案例二 神经毒素BMAA
神经毒素 BMAA(β-Methylamino-L-alanine),是一种由蓝藻产生的非蛋白基因编码氨基酸, 它能杀死神经元，加速动物脑神经退化。所以在相关海洋产品中准确测定BMAA就十分重要。 Daniel G[2]使用HILIC-DMS-MS/MS方法测定贝类中的BMAA和其他17种常见氨基酸，DMS能明显降低内源性干扰，同时降低本底噪音，见图2 。虽然使用DMS后，待测物的绝对信号有所下降，但由于噪音和干扰化合物强度下降的更多，所以整体信噪比是提高的。该方法和相同条件下的HILIC-MS/MS方法比较，能大大提高灵敏度和稳定性。
图2. HILIC-DMS-MS/MS (A) 和HILIC-MS/MS (B)方法测定肌肉组织中的BMAA, 样本中添加了125 nM 13C15N2-BMAA 和 125 nM D3-BMAA BMAA。结果展示DMS能显著降低内源性干扰，提高灵敏度和稳定性。
案例三 类固醇类激素
类固醇类化合物在体内扮演着重要的激素作用。但因其离子化效率低，内源性干扰，同分异构体化合物间有相同的母离子和子离子，导致其定量一直存在较大的挑战。Julie A【3】使用LC-DMS-MS/MS技术在两个方面减小了人血浆中类固醇化合物测定挑战。一方面是DMS 提供了同分异构体的分离，文献中提到皮质酮(corticosterone)和脱氧皮质醇 (11-deoxycortisol), 脱氧皮质酮(11-deoxycorticosterone)和17-羟基孕甾酮(17-hydroxyprogesterone)，这两对化合物都有一样的MRM 离子对信息， DMS能很好的分离它们。另一方面是DMS 去除了未知内源性干扰，见图3。 DMS使用前后色谱图比较，以孕酮为例，使用DMS去除本底干扰，血浆添加2.2 nmol/L样品的信噪比提高了10倍。
图3. Julie A【3】展示DMS ON状态下除去内源性噪音的结果。结果展示，大量内源性干扰被去除，DMS ON状态下，待测化合物绝对信号强度虽有一定下降，但噪音下降的更多，所以S/N升高。
婷视角——关于SelexION®技术
如果我们在定量中遇到上述3种情况，SelexION®技术能助我们一臂之力。
1. 定量中的强基质干扰或高本底噪音导致的信噪比不佳；
2. 化合物因低MS/MS碰撞效率导致的灵敏度不佳(如：环肽化合物)；
3. 同分异构体分离定量。
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【参考文献】
1. Differential Mobility-Mass Spectrometry Double Spike Isotope Dilution Study of Release of β- Methylaminoalanine and Proteinogenic Amino Acids during Biological Sample Hydrolysis.
DG. Beach , ES. Kerrin, SD. Giddings, MA. Quilliam & P McCarron. Scientific Reports
2. Performanceen hancement in the measurement of 5 endogenous steroids by LC–MS/MS combined with differential ion mobility spectrometry.
JA. Raya, MM. Kushnira, RA. Yost, AL. Rockwooda, AW Meiklea. Clinica Chimica Acta
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