在进行表达载体的构建、目的蛋白质的表达等实验时，通常需要获得一段目的基因。我们可以根据您提供的已知参考序列 (NCBI上已发表)，以基因组DNA或总RNA为模板，获取您所需要的某个区域的一段基因，并将之与克隆载体进行体外连接，然后再转化到宿主菌中进行克隆、筛选，以此获得质粒重组体。

一、服务内容

1. 基因钓取

*         基因组DNA/总RNA的提取

*         以基因组DNA为模板通过PCR扩增得到目的基因

*         以总RNA为模板通过RT-PCR扩增得到目的基因

*         目的基因PCR产物的纯化及测序

*         目的基因的克隆及测序

2. 基因克隆

*         目的基因的转载体：将含有目的基因的质粒采用双酶切的方法克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上。

*         如果客户提供PCR产物进行亚克隆：我们建议先进行TA克隆，再进行亚克隆。

*         目的基因的PCR克隆：将模板（通常为质粒）上的一段序列通过PCR加酶切位点后克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上。

*        对已有载体进行改造。

二、实验步骤及周期

*         从动物组织或细胞中获取gDNA或者cDNA；2～3个工作日。

*         PCR扩增相关基因或功能元件，连接至T载体测序；8～9个工作日。

*         将测序后符合要求的基因或功能元件片段亚克隆至目的载体；10个工作日。

三、基本费用

1. 基因钓取

扩增的基因或功能元件大小在1.5k以内，800元；
       片段大小在1.5k～2.5k，1200元；
       片段大小在2.5k～3.0k，1600元。

注: 1). 以上实验费用及周期是针对正常实验样品制定的，样品特殊(包括样品中基因丰度较低、核酸含量较少或者所需调取基因较长的样品等)或样品多时除外。

 2).  亚克隆费用请参见亚克隆部分（如客户只需要连接在T载体上的基因或功能元件片段，此费用可免）。

2. 基因克隆

    根据客户要求将指定片断按照相应的方向和读框装入指定表达载体，如克隆位点无特殊要求，我们将自行选择合适的酶切位点