点击查看下载同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)蛋白质组学碧云天 应用于蛋白相关资料,进一步了解产品。
碧云天蛋白质组学技术服务
iTRAQ (Isobaric tag for relative and absolute quantitation,iTRAQ)是由AB SCIEX公司研发的一种多肽体外标记技术,该技术采用4种( iTRAQ® reagents-4plex)或8种( iTRAQ® reagents-8plex )同位素标签,通过标记肽段(Peptide)特异氨基酸位点,然后进行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样本中蛋白质的相对和绝对含量。
碧云天iTRAQ技术原理
iTRAQ试剂结构由报告基团(Report group)、平衡基团(Balance group)和肽反应基团(Amine-specific reactive group)三部分组成,形成4种或8种相对分子质量均等量(145或305)的异位标签,用于标记酶解后的肽段。在质谱中,任何一种iTRAQ试剂标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。以4标试剂为例:报告基团相对分子质量分别为114、115、116和117;平衡基团相对分子质量分别为31、30、29和28,肽反应基团将iTRAQ试剂与肽段上赖氨酸(Lysine,K)及N端氨基酸残基相连,4种报告基团通过平衡基团与肽反应基团相连,形成4种相对分子质量均为145的等量异位标签。
iTRAQ试剂结构
在串联质谱中,报告基团、平衡基团和多反应基团之间的键断裂,平衡基团丢失,带不同同位素标签的同一多肽产生不同的报告离子,根据报告离子的信号强度可获得样品间相同肽段的定量信息,通过软件处理得到蛋白质的相对和绝对定量信息。
iTRAQ标记定量原理
碧云天iTRAQ技术服务项目表
服务编号 | 服务名称 | 服务时间(工作日) | 全额预付特价(元)/样本 | 半额预付特价(元)/样本 | 零首付价(元)/样本 | 服务内容 | 交付结果 |
T2301 | iTRAQ | 45-50 | 6000 | 6300 | 7000 | 2标 | 1. 蛋白质检报告; 2. 实验报告; 3. 生物信息学分析结果; 4. 质谱检测原始数据 |
T2302 | 5350 | 5650 | 6250 | 4标 | |||
T2303 | 4888 | 5250 | 5800 | 6标 | |||
T2304 | 4500 | 4800 | 5300 | 8标 | |||
T2309 | 组织提取定量 | ≤10 | 390 | 420 | 460 | ||
T2310 | 血液样本前处理 | 1300 | 1400 | 1550 |
请您下载并填写《碧云天蛋白质组学服务询价单》,发送至service@beyotime.com,我们将为您设计最佳方案。
若有订购意向,碧云天的技术服务人员会与您联系,并签订《碧云天蛋白质组学技术服务协议书》。
送样时,请下载并填写《碧云天蛋白质组学生物样品信息表》,发送至service@beyotime.com或碧云天蛋白质组学技术服务人员邮箱。样品的具体要求参见《碧云天蛋白质组学生物送样要求》。
通量高:可同时对2-8个不同条件样本进行蛋白质差异分析;
适用范围广:iTRAQ试剂几乎可以与样本中所有的蛋白结合,同时因为是体外标记,所以对各种动植物组织、微生物、血液、体液、细胞培养物以及分泌物等样本均可进行分析;
灵敏度高:可检测出低丰度蛋白,胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等;
分离能力强:可分离出强酸(碱)性蛋白、<10KD或>100KD的蛋白质分子;
结果准确可靠:二级质谱蛋白序列覆盖率提高,鉴定结果更可靠,同时一个蛋白质有多个肽段被鉴定,进一步提高了定量的准确性;定性与定量同步进行,同时得出鉴定和定量结果,重复样品间的蛋白表达量相关性可达到0.95以上。
建议送原始样本,除非客户已经熟练掌握蛋白质组学的蛋白提取方法。
动物组织样品:湿重不少于200 mg,样品不能溶血,PBS灌注冲洗组织直至去除血液。软骨或骨头等样本,建议不低于400mg。
植物组织样品:湿重不少于2 g,取材后用PBS冲洗至少3遍直至去除杂质。
菌体样品:原则上只接受常见无毒菌的菌体样品,菌体沉淀不少于100 mg或者体积不少于100 μL;若为含有毒菌的菌体样品或菌体裂解液,按照《病原微生物技术服务操作指南》执行。
细胞样品:收集细胞沉淀,PBS冲洗3遍(以防残留血清中的白蛋白影响鉴定结果),送样量为1×107或细胞沉淀不少于50 μl。
培养基上清液:需保证无菌体或细胞(用0.2 μm膜过滤),条件允许可浓缩后再寄送;送样体积不少于10 ml。
血清样品:新鲜血液取出后,4℃,2000 g,离心15 min,取上清,即得血清;血清制备过程中保证不能溶血;血清体积要求不少于500 μl;制备血清过程中,客户可根据自己样品和实验要求选择是否添加抗凝剂,一般不用添加。
若客户直接提供蛋白样品,则蛋白量不少于1 mg,浓度不低于2 mg/mL。
样品的具体要求及寄送条件详见《碧云天蛋白质组学生物送样要求》及《碧云天蛋白质组学生物样品信息表》。
疾病表型的分子机制研究、药物作用靶点研究、信号转导研究、蛋白质互作研究、分子标志物发掘、蛋白翻译后修饰
应用案例Gezi Li, et al., Large-scale proteomics combined with transgenic experiments demonstrates an important role of jasmonic acid in potassium deficiency response in wheat and rice, molecular & cellular proteomics, 2017.
应用技术:iTRAQ
IF:6.3