产品描述
在后基因组时代，对基因组候选区段的重测序的需求日益增加，候选区段的范围在5K-100K之间，只用传统的Sanger法或目标区域杂交捕获测序价格昂贵。因此基于超高重PCR的扩增子捕获测序应对该区段范围适用性强，针对连续区段，外显子靶标以及客户指定位点，特异设计优化捕获引物，多重PCR一次捕获所有位点，提供预混引物以及反应试剂，方便客户自行实验。
上海翼和生物超高重PCR建库技术，利用自主开发的多重PCR引物设计软件，结合知识密集型的多重PCR优化技术，克服扩增效率不均一问题，保证每个扩增子间拷贝数差异控制在平均深度的5~10倍以内（利用ABI 7900定量PCR检测多重PCR产物，根据ct值判读产物浓度，确保产物间的均一性）。
使用超高重PCR建库试剂盒HiTM- Primers，在建库过程中引物端自动加上区分样本barcode，无需二次建库，两轮PCR完成整个建库过程。试剂盒内容包含：靶向捕获特异性引物Mix，测序平台定制接头，纯化试剂，扩增反应体系等。只需拥有自己的测序平台，HiTM- Primers帮您完成建库所有问题。
应用领域：孟德尔遗传性疾病的筛查和诊断，精准医疗研究与应用等。
到目前为止，多重PCR扩增效率的一致性一直是一大难题，同一个反应体系中，引物越多，引物间相互干扰的问题就越严重，从而造成扩增子无法被扩增或扩增子间扩增不均一的问题。上海翼和生物利用自主开发的多重PCR引物设计软件，并且在引物上进行基团修饰，引物所携带的修饰基团隔离开其他引物，使得同一反应体系中，完成更多引物的同时扩增。
引物设计：根据客户需求（对连续区段，外显子靶标以及客户指定位点），基于超高重PCR的扩增子捕获测序，利用上海翼和生物自主开发的引物设计软件，设计特异性捕获引物。
引物优化：利用多重PCR引物优化技术，使扩增子间均一性好，保证每个扩增子间拷贝数差异控制在平均深度的5~10倍以内（利用ABI 7900定量PCR检测多重PCR产物，根据ct值判读产物浓度，确保产物间的均一性），90%扩增子reads数大于15，不浪费测序通量。
试剂盒组成：试剂盒包含包含从扩增到建库到测序前纯化所用到的所有内容，购买一个试剂盒即可完成整个建库过程。
上海翼和应用生物技术有限公司
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