功能鉴定 

miRNA过表达载体的构建方法

简介：
    构建miRNAs表达载体，实现miRNAs在细胞中稳定过表达，能够弥补瞬时转染持续时间短的不足，过表达的方式通常包括pri-miRNA，pre-miRNA与成熟miRNAs形式，莱德尔技术使用的是以下两种方式：
● pri-miRNA（含侧翼序列）的表达形式，Ⅱ型启动子载体；
● pre-miRNA的表达形式，U6启动子载体。
 

服务流程：
1、miRNAs序列分析；          
2、PCR引物设计及合成；
3、PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列；
4、将片段克隆至Ⅱ型启动子载体或者U6启动子载体；
5、测序以确保插入序列正确性；
6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。

客户提供：待研究miRNA序列信息。