冷冻扫描电镜技术服务 扫描电镜检测一直面临着一个非常大的问题，那就是待测样本通常都含有很高额的水份。而常规制样方法，需要经过多次的脱水过程才能进行扫描电镜观察。这样，很多样品拍出来的效果和真实状态相差很大。在结构形态上，往往显得干瘪，变形。 冷冻扫描电镜是克服样品含水问题的一个快速、可靠和有效的方法。样品不经过繁杂的脱水过程，而是直接将样本置于温度比液氮更低的液氮泥中。这时的水分快速固化却保持体积不变。设备经过断裂，拍摄。极大地保证了样品本来的面貌。不再干瘪，变形。冷冻扫描电镜技术还广泛地被用于观察一些“困难”样品，如那些对电子束敏感的具有不稳定性的样品。冷冻扫描电镜技术还有一个常被忽略的应用领域，即通过不同的时间间隔的样品溶解来研究动态过程（工业上或其他方面应用）。 用冷冻扫描电镜技术对植物幼嫩组织进行观察 ,可在更接近自然状态下观察到样品的形貌。在实验中 ,由于植物生长发育受季节的影响造成样品过分集中 ,以致难于在预期内完成观察任务 ;此外 ,常规冷冻扫描法无法接受远地采集的样品进行冷冻观察。 因此对冷冻扫描样品的前处理进行研究很有必要。 常规扫描电镜样品制备的缺点： 1、在脱水过程中样本会皱缩和变形； 2、可溶性物质被溶解提取，破坏了样本原有状态； 3、可弥散性物质的移位 4、机械损伤，脆弱样品在常规操作时易损伤 5、制备过程慢（常在24小时以上），繁琐，复杂 6、有各种有毒试剂，对操作人员有身体有害。 冷冻扫描电镜技术的优点： 1、 无繁杂制样过程，能保持可溶性物质 2、 可弥漫物质很少移位 3、 机械损伤小 4、 基本上不用有毒试剂 5、 是对样品进行动态实验的唯一方法（不同时间间隔冷冻-在实验室内或外面 6、 很适合液体、半液体、和电子束敏感样品 7、 具有选择性刻蚀能力（通过升华显露内在信息） 8、 具有重复使用样品能力（例如：对样品重复断裂和涂覆） 上海釜诚生物科技有限公司专注于生物材料电镜检测服务。专业提供常规生物材料透射电镜、扫描电镜、冷冻扫描电镜、激光共聚焦技术服务。尤其擅长动植物组织与细胞电镜检测。近年针对细胞自噬这一研究热点，我们利用高分辨率透射电子显微镜，推出了细胞自噬的电镜服务，获得了广大客户的一致好评。迄今为止已经接手了500多例细胞自噬电镜样本的检测，地域遍及全国27个省市自治区。另外，我们在细胞吞噬纳米材料、动物组织细胞器、植物叶片，植物果实等方面也拥有丰富的实验经验。 上海釜诚生物科技有限公司 上海市东高路680号柠檬公寓A120室 联系电话****** 刘振 QQ：2441149844 邮箱：bio_fcen@163.com 实验案例：南方大口鲇( Silurus meridioma1is) 鳃的冷冻扫描电镜观察 1， 将活鱼放入经预冷的 1%戊二醛液( 0. 1mol L ,pH7. 3 +5%蔗糖的二甲胂酸钠缓冲液配制) 中固定15min; 2， 确认鱼体不活动后 , 再将鳃取下放入相同缓冲液配制的 3%戊二醛固定液中 , 室温下后固定2h ; 3， 5%蔗糖液清洗 3 次 。将材料取出固定在经预冷的电解铜样品座上 , 投入氮泥中速冻 30s; 4， 部分观察样品在放大镜下手工快速断裂样品在DW-1 型低温显微装置上溅射镀金膜和冷冻观察,KYKY-1000B 型扫描电镜( 经计算机图像处理改造) 记录