❀实验流程

1. 构建敲除 /shRNA/ 过表达病毒质粒；

2. 跟病毒质粒系统中另外 2 个质粒，一起电转 293T 细胞，包装病毒；

3. 离心收集病毒；

4. 病毒浓缩纯化，发货前质量检测；

5. 侵染靶细胞，混合克隆检测；

6. 单克隆筛选及验证。

慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后，可用于:

1. 非常难转染的细胞，例如神经元细胞、原代细胞、干细胞、肿瘤细胞等，针对这类细胞慢病毒载体的转染效率接近100%；

2. 构建稳定表达或者沉默特定基因的单克隆细胞株；

3. 活体动物模型（in vivo）的基因操作；

4. 可调控表达，经过特定的元件修饰的慢病毒表达载体，可实现只有在特定的外源或内源物质的作用下才能产生表达，从而调控目的基因的定时、定量表达。