本实验可检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA的断裂情况，其原理是不同标记（荧光或者生物素）的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3‘－OH末端，再通过荧光激发或者化学显色的方法，特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在显微镜下即可观察和计数凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。本实验适用于组织和细胞样本的凋亡原位检测。

操作步骤

一、样品处理

1. 细胞样品：自然晾干的细胞样品固定；封闭；通透液促渗

2. 冰冻样本：PBS浸润；封闭；通透液促渗

3. 石蜡样品：脱蜡及水化；微波或蛋白酶K修复；封闭

二、标记反应

1. 荧光标记：滴加TdT酶反应液，反应；荧光显微镜检测

2. 生物素标记：滴加TdT酶工作液反应；滴加Streptavidin-HRP工作液反应； DAB显色；苏木素复染；显微镜观察拍照。

客户提供

样品及相关信息。

服务期限

1-2周，或商议。

我们的结果

实验报告书、试验方法及步骤、原始数据、图片。

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