3. 样品要求 取样建议: a. 对叶片、茎、花等组织,取下后立即放入液氮中速冻2分钟以上,然后转移到-80℃保存,避免反复冻融。较大叶片需要用剪刀快速剪碎。 b. 对地下组织(根、块茎等),将分离出的样本快速用灭菌水清洗,吸水纸吸走多余的水分后,立即放入液氮中速冻2分钟以上,然后转移到-80℃保存。块根等组织,需要切成1-2cm大小块状。 c. 对果肉、果皮组织,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30分钟内)转移至室内,低温条件下将分离果皮或果肉切成1-2cm块状,立即放入液氮中速冻2分钟以上,然后转移到-80℃保存。 d. 对细胞样本,取样后离心去除培养基,立即放入液氮中速冻2分钟以上,转移到-80℃保存。 混合取样: 取样时为了保证样品的准确性和减少系统误差,每份样品选取3株以上长势一致的材料混样。 4. 案例分析 案例分析:MdUGT88F1介导的根皮苷生物合成调节苹果发育和腐烂病抗性。 根皮苷是苹果中最主要的二氢查尔酮,其含量约占叶片可溶性总酚的90%左右。MdUGT88F1基因被RNAi干扰后,减少的根皮苷通过调节苯丙烷素途径流通量,间接造成木质素合成积累减少,同时通过间接减少肌醇含量,造成植株细胞壁果胶组成发生变化。最终干扰植株表现为生长发育受抑制,抗病能力增强。