TMT™(Tandem Mass Tag™)技术是由美国Thermo Scientific公司研发的一种多肽体外标记技术。该技术现在可采用16种同位素的标签,标记多肽的氨基基团,LC-MS/MS分析,可同时比较16组不同样品中蛋白质的相对含量。在疾病标记物筛选、药物作用靶点、动植物抗病/抗胁迫机制、动植物发育分化机理等领域都有广泛应用。
特点:
1.灵敏度高:低丰度蛋白也能检测;
2.使用范围广:几乎可对任何物种的各种蛋白质进行分离鉴定;
3.高通量:能同时对16个样品中包含的蛋白质进行鉴定及表达差异分析,可消除多批次标记不平行问题,进一步减少定量数据丢失;
4.数据质量有保障,价格更优惠:原有的TMT11标一次最多只能标记11个样品,样品个数超过11个需要分批次标记,平行性及重复性难保证。分批次标记则需要设置搭桥,否则稳定性无保证;而设置搭桥,费用将几乎翻倍,性价比不是特别高;TMT 16标一次性可标记16个,无需分批次和设置搭桥,性价比更高。
TMT SPS技术原理
SPS,即synchronous precursor selection ,同步母离子选择。与MS2定量不同的是,TMT SPS 采用MS3定量。主要原理是采用母离子碎裂产生的MS2子离子进行定性,而在这些MS2子离子中挑选一个或者多个碎片离子进一步的碎裂,产生的报告离子用来进行定量分析。
SPS MS3优势:
降低共流出肽段的干扰,定量更准确