TMT蛋白质组学技术
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TMT蛋白质组学技术

产品属性

  • 品牌正达康健
  • 产地北京
  • 型号TMT蛋白质组学技术
  • 关注度21
  • 信息完整度
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产品描述

TMT(Isobaric tandem mass tag)是由Thermo Scientific公司推出的一种等重同位素标记技术,目前有2标、6标和10标三种试剂,可分别用于对6种或10种不同实验条件的样品进行标记和同时检测。

技术原理

TMT在原理上与iTRAQ技术相同,标记试剂的分子结构也由3部分组成:报告基团(report group)、平衡基团(balance group)和肽反应基团(amine-specific reactive group)。NHS可与肽片段N端的氨基及赖氨酸的ε-氨基高效反应,对样品中几乎全部肽片段进行TMT标记。报告基团和质量平衡基团中含有不同量的13C、15N和18O稳定同位素,使得这两部分总体具有相同的质量。以6标方法为例,标记后,来自不同样品的相同肽片段在一级质谱(MS1)中具有相同的m/z,在二级质谱(MS2)中肽片段经碰撞碎裂(CID或HCD)后释放出不同标记的报告离子,m/z 分别为126、127、128、129、130和131,根据不同报告离子的信号强度,可以对不同样品间的蛋白进行定量比较。

技术优势

  • 一次实验中可同时标记2-10组样本;

  • 可用于动物、植物、微生物、临床、体液或细胞等多种样本标记,几乎适用于所有类型的生物样本;

  • 重现性好、灵敏度高、定性与定量可同时进行;

  • 检测限低,可检测出低丰度蛋白;

应用领域

  • 基础医学、临床诊断:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,个性化治疗等;

  • 生物医药:药物作用机理,药效评价,药物开发等;

  • 农林领域:抗逆胁迫机制,生长发育机制,育种保护研究等;

  • 畜牧业:肉类及乳品质研究,致病机理研究等;

  • 微生物领域:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等;

  • 海洋水产:渔业资源,海水养殖,渔业环境与水产品安全等;

  • 生物能源、环境科学领域:发酵过程优化,生物燃料生产,环境危定风险评估研究等;

  • 食品营养:食品储藏及加工条件优化,食品组分及品质鉴定,功能性食品开发,食品安全监检测等。

样品要求

  • 组织类型:动物组织≥100mg、植物组织≥100mg、微生物≥20mg;

  • 细胞样品:每样品细胞量 ≥ 1X107

  • 蛋白提取物:≥100µg

  • 体液:血清/血浆≥200µL、尿液≥1ml、唾液/脑脊液≥1ml、泪液≥1mL、支气管灌洗液≥3ml;

  • 外泌体:≥10µL

  • FFPE石蜡包埋切片:≥0.3 mm * 0.3 mm

参考文献

[1]. Thompson, A, et al. Tandem mass tags: a novel quantification strategy for comparative analysis of complex protein mixtures by MS/MS. Anal Chem. 2003; 75(8):1895-1904.

[2]. Dayon, L, et al. Relative quantification of proteins in human cerebrospinal fluids by MS/MS using 6-plex isobaric tags. Anal Chem. 2008; 80(8):2921-31.

[3]. Zhuang, G, et al. Phosphoproteomic analysis implicates the mTORC2-FoxO1 axis in VEGF signaling and feedback activation of receptor tyrosine kinases. Sci Signal. 2013; 16; 6(271):ra25.


北京正达康健生物医学科技有限公司

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