通过液质联用技术（LC-MS/MS）对IP、Co-IP、Pull-down等纯化样本中的蛋白混合物进行鉴定，可同时鉴定目的蛋白及其相互作用蛋白，从而构建与目的蛋白的蛋白质相互作用谱。该技术既适用于蛋白混合物的SDS-PAGE分离后经胶内酶解（in-gel digestion）的质谱分析，也适用蛋白混合物溶液内直接酶解（in-solution digestion）的质谱分析。

技术原理

技术优势

• 适用于相对复杂的蛋白质样本鉴定，如互作蛋白分析；

• 准确性和灵敏度高；

• 高准确性、高特异性、项目周期短。

应用领域

• 基础型研究；

• 适用于鉴定IP、co-IP以及pull-down方法制备蛋白质溶液鉴定。

样品要求

• 双向凝胶胶点：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见；

• SDS-PAGE条带：考染、银染（质谱兼容）点清晰可见

• 蛋白质溶液：蛋白总量>5ug，浓度>0.1ug/ul，缓冲液不含去污剂SDS、NP40，Triton X-100等

参考文献

[1]. Protein kinase A-mediated phosphorylation of the Broad-Complex transcription factor in silkworm suppresses its transcriptional activity. J Biol Chem. 2017