基因甲基化
基因甲基化对生命活动非常重要，是最早发现的基因表观修饰方式之一，它在维持细胞正常功能、传递基因组印记，胚胎发育、肿瘤发生等方面起着至关重要的作用，更是表观遗传学研究的热点。
通常DNA甲基化发生在CG双核苷上，即在DNA甲基化转移酶（DNMTs）的作用下使CpG二核苷酸5’-端的胞嘧啶转变为5’-甲基胞嘧啶。DNA甲基化主要形成5－甲基胞嘧啶（5-mC）和少量的N6-甲基嘌呤（N6-mA）及7－甲基鸟嘌呤（7-mG）。这种DNA修饰方在不改变基因序列前提下实现对基因表达的调控。
甲基化位点可随DNA的复制而遗传，因为DNA复制后，甲基化酶可将新合成的未甲基化的位点进行甲基化。DNA的甲基化可引起基因的失活。

实验步骤
1、复苏并培养细胞，当细胞长至一定程度后，收细胞沉淀并提取其DNA. .
2、使用EZ DNA METHYLATION-GOLDM KIT 试剂盒，将DNA进行亚硫酸氢盐修饰
3、将上一步中已亚硫酸氢盐修饰的DNA模板进行PCR扩增
4、切胶回收。
5、TA-c loning和转化。
6、涂平板进行蓝白斑筛选。
7、当菌落长至一定程度后，挑选白色菌落进行菌落PCR (体系同BSP)。
8、挑选上一步中跑胶出现条带的白色菌落先将其加入约3ml的不含抗性的LB液体培养基中摇过夜，后取其1ml送去测序。其余的菌液取500ml加入500ml 50%的甘油冻入-80C冰箱。
9、测序结果分析

结果展示：








实验完成周期及交付标准：
1.实验周期: 1周
2.交付标准：完整实验报告（电泳照片、测序报告等）


需确认的信息（客户提供）：
1细菌、细胞样品需新鲜培养；动物组织、植物组织等样品取样后需液氮速冻。
2用于提取基因组DNA的血液样品在4℃下可保存一周，-20℃下可保存1个月。
3实验样品最好使用干冰运输。