慢病毒包装                         

相关知识：

    在有关转染的研究中，为了感染原代细胞和难感染的细胞系，研究者借助于病毒载体实现。由于慢病毒可以同时感染分裂和非分裂细胞、整合性以及免疫原性低等优点，目前在RNAi的研究中，基于慢病毒构建的shRNA被最广泛的使用。而在RNAi研究需要长期观察或者需要进行动物实验时，基于慢病毒构建的shRNA的优势更为明显。

实验流程：

1）根据目的基因相关信息（序列，序列号等），对每条目的设计3条siRNA序列，其中一条序列为阴性对照组；
2）根据设计好的siRNA序列，设计，合成两条互补的短片段的DNA；
3）对合成好的DNA片段进行稀释，退火，连接到线形化处理过的载体，转化，涂平板，过夜培养；
4）通过 PCR的方法筛选阳性菌落，进行测序，分析测序结果；
5）对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量的不含内毒素的 siRNA病毒穿梭质粒；
6）利用构建好的质粒做转染实验，48小时后通过实时荧光定量和Western的方法分析目的基因，筛选出一条最有效的siRNA序列；
7）筛选出的高效重组载体和病毒包装质粒共转染 293T细胞，进行病毒包装和生产，收集病毒液；
8）浓缩、纯化病毒液，测定滴度。

慢病毒包装流程

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靶基因信息。

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慢病毒包装实验报告单，提供1*108TU/ml病毒（1 ml），对照病毒（200 μl）等。

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公司简介

   莱博生物是一家综合的科研服务机构，可为科研工作者提供基因水平、蛋白质水平、细胞水平、组织病理检测、动物实验等实验平台。公司建立了标准化的实验室，配备了先进的实验仪器，可向广大客户朋友全程开放。同时，我司拥有数十位博士硕士专业技术人才，资深的技术老师确保全程解决方案优化调整及实验质控，专业化的实验人员也保证了实验操作流程的规范性和实验结果的价值。莱博生物近年来主攻miRNA、lncRNA、circRNA、外泌体等研究方向，协作了多项国家自然科学基金重大项目、面上、地区、青年项目及各省市科技项目等，为广大客户朋友提供了优质的综合解决方案，广受好评。

莱博生物科研平台包括：

具体实验案例：