双十二送豪礼！

活动时间：2018年12月3日-2018年12月18日

活动内容：BSP，Bisulfite处理DNA，原价70，现价只需19.9！！

活动说明：忙忙碌碌十二月，英拜服务送优惠！服务有限等你来，大好机会勿错过！（本活动最终解释权归上海英拜生物科技有限公司所有）

详情请咨询******nbsp; ******nbsp; ******nbsp;******nbsp;******nbsp;******br> 

BSP：

原理：结合Bisulfite的测序法是一种灵敏的能直接检测分析基因组DNA甲基化模式的方法。Bisulfite处理后，用针对改变后的DNA序列设计特异性引物并进行聚合酶链式反应（PCR）。 PCR产物中原先非甲基化的胞嘧啶位点被胸腺嘧啶所替代，而甲基化的胞嘧啶位点保持不变。PCR产物克隆后进行测序。通过这个方法能得到特定位点在各个基因组DNA分子中的甲基化状态。

特点：
1. 特异性高，它能够提供特异性很高的分析结果，这是所有其他研究甲基化的分析方法所不能比拟的；
2. 灵敏度高，可以用于分析少于100个细胞的检测样品。用微量的基因组DNA进行分析就能得到各个DNA分子精确的甲基化位点分布图。

流程图：

流程：DNA用Bisulfite处理后进行PCR扩增，扩增片段纯化后连接进载体，转化大肠杆菌，过夜培养后挑单个阳性克隆进行测序。得到每个DNA分子特定区域甲基化位点的分布图。
 
实验步骤：
A．DNA制备
用DNA抽提试剂盒（Promega, cat. no. A1125）抽提组织，细胞培养物，石蜡包埋组织切片样品中的基因组DNA。
B．Bisulfite处理
C．DNA纯化
用Wizard DNA clean-up kit (Promega, cat. no. A7280)纯化Bisulfite处理后的DNA样品。
D．DNA脱磺基反应
E．PCR扩增
F．PCR产物琼脂糖电泳后回收纯化，随后连接到pGEM-T EASY 载体中克隆及测序。