产品说明:大肠杆菌感受态BL21使用特殊工艺制作,可用于质粒DNA化学转化,转化效率较高
产品特点: BL21菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达
使用方法:
从-70℃ 超低温冰箱中取出一管感受态菌,冰浴10 min使其解冻;
加入适量目的质粒DNA,冰浴30 min;
插入42℃水浴中90S进行热休克,然后冰浴5 min;
加入0.7ml无抗LB培养基(培养基预热至37℃),然后37℃ 160-180rpm/min震荡培养45-60min;
取上述转化混合液100-300μl,在含合适抗菌素的固体LB平板培养皿上用玻璃涂布棒涂布均匀;
*如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话,滴完菌液后再在平板上滴加40μl 2% X-gal,8μl 20% IPTG,涂布均匀;
放入37℃恒温培养箱倒置培养过夜;
观察平板上长出的菌落克隆
储存条件:-70℃保存6个月,不适宜液氮保存
规格:100ul/只
注意事项:
刚化冻的感受态细胞转化效率最高;
避免反复冻融;
避免移液枪反复吹打;
震荡培养转速不宜过高,时间不能超过60min;
转化操作需要轻柔;
加培养基、涂板等操作需要在超净工作台中进行;玻璃涂布棒需要用酒精灯烧过