对于绝对实时荧光定量PCR实验来说，质粒的质量往往决定着实验的成败，因为需要质粒作为模板来制作标准曲线。

       标准曲线的制备是绝对荧光定量PCR实验的关键步骤，方法是先将测定基因的目的片段连接到载体中，然后转化大肠杆菌，获取阳性克隆，提取质粒，测定质粒浓度、计算其拷贝数。最后把质粒稀释成不同浓度的标准品，依据这一系列标准品进行荧光定量PCR，获得Ct值，然后拟合出标准曲线。 
       测定样品时，标准品与未知样品同时进行PCR循环，根据未知样品的Ct值，结合标准曲线来求得未知样品cDNA的起始拷贝数。 我们为您提供质粒标准品的构建服务，用于制作标准曲线，计算出基因的拷贝数。

实验说明：

1.    客户应提供获目的基因的序列。

2.    客户应提供实验所需的原材料，如模板，引物，或者载体等。

3.    客户若只提供组织或者细胞，我们则需要提取RNA或者DNA，扩增出目的条带后连接载体。

4.    实验周期：1-2周。