定量PCR

一、定量PCR服务介绍 

 
在普通的PCR体系中加入特异嵌合入DNA的染料，之后在每轮反应进行的时候收集荧光信号，可以间接反映体系中已经生成的PCR产物数量。配合标准品建立实时扩增曲线，能够测定位置样品中起始的DNA拷贝数。做到真正意义上的DNA的定量。我公司使用 ABI StopOne Plus 荧光定量PCR仪，可以提供可靠的实验数据，专业的技术支持，从实验设计开始就能为您提供帮助，结合优化的Taqman探针，确保实验成功。项目进行中实时沟通，实现你的实验设想，解答您的问题。我们提供详实完整的实验报告，能为您轻松分析实验结果。

本实验主要应用领域有：
1. 分析点突变和等位基因
荧光定量PCR可以进行点突变和等位基因分析，用不同的荧光报告基团标记Taqman探针，然后分别与野生型和突变型杂交。如果一种荧光信号明显强于另一种荧光信号，则表明它是纯合子；如果两种荧光信号都明显增强，则表明它是杂合子。

2. 基因表达的定量分析
荧光定量PCR可以对各种基因的表达进行定量分析。如同一基因在不同组织中的表达差异、同一基因在不同药物处理后的表达差异、转基因食品的检测等。

3. DNA甲基化检测
用重亚硫酸盐处理DNA后，未甲基化的胞嘧啶（C）会转变为尿嘧啶（U），而甲基化的胞嘧啶（C）则保持不变。采用实时荧光定量，用特异性的引物和Taqman探针区分甲基化和非甲基化的DNA，这种方法不仅方便而且灵敏度高。

4. 单核苷酸多态性分析
荧光定量PCR可以进行单核苷酸多态性的分析，检测单核苷酸多态性对于研究个体对不同疾病的易感性或者个体对特定药物的不同反应有着重要的意义。因分子信号标记结构的巧妙性，一旦SNP的序列信息是已知的，采用这种技术进行高通量的SNP检测将会变得简单而准确。

5. 定量定性分析传染性疾病
荧光定量PCR技术可以对传染性疾病进行定量定性分析。目前，已开发出一系列临床检测试剂盒，如肝炎系列、性病系列、肿瘤系列等。
 
 
二、定量PCR服务内容 

1．提取基因组DNA或RNA；
2．反转录为cDNA（若是DNA样品，跳过此步骤）；
3．设计合成引物/探针；
4．优化PCR反应体系，并使用Real-time PCR检测；
5．收集结果，并完成数据分析。
 
 

           
     荧光定量PCR设备                          荧光定量PCR结果

 

三、定量PCR服务说明  
 
1.样品要求：
1)如果实验材料为动物组织样品，质量应大于1 g；
2)如果实验材料为植物样品，样品质量大于2 g；
3)如果实验材料为培养细胞，细胞数目应大于1×106~7个；
4)如果实验样品为血液样品，体积不少于1.5 mL。

2样品纯度要求：
1)如果实验材料是OD 260/280在1.8-2.0之间，RNA无降解、28S和18S核糖体RNA条带清晰明亮，28S的密度大约是18S的2倍。或者Agilent 2100检测仪分析RNA的完整性数据RIN ≥ 8；
2)无蛋白质、基因组中DNA污染，如有污染请除去蛋白并进行DNase I处理。

3实验周期：1-2周；

4若另有疑问欢迎向本公司咨询，我们将竭诚为您服务。

 
四、定量PCR服务质量承诺  

1.权威的荧光定量PCR实验报告；
2.真实的原始实验数据；
3.详细的实验步骤。