实验技术服务-慢病毒包装与感染
实验原理
慢病毒属于逆转录病毒科。慢病毒载体是指以人类免疫缺陷病毒-1 (H IV-1) 来源的一种病毒载体,包含了包装、表达、稳定整合所需要的遗传信息。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下,经过病毒包装成为有感染力的病毒颗粒,通过感染细胞或活体组织,实现外源基因在细胞或活体组织中表达。 目前比较广泛采用的第三代包装系统——四质粒系统,只含有HIV-1共9个基因中的3个,即gag、pol、rev。由于HIV-1基因组成分中60 %被去除,因此父代病毒无法复制,是目前重组系数最低的一个慢病毒包装系统 。 采用四质粒系统,即目的基因表达达载体和三个包装质粒, pMDLg/pRRE、pVSV-G和pRSV-Rev,在293-T细胞株中可包装出慢病毒颗粒。
实验流程
实验结果