艾基生物有近十年的Sanger测序经验，针对样品的复杂程度摸索出一系列的解决方案，并且在Sanger测序平台的基础上将应用扩展至分子生物学上游的多个领域，包括：SNP 检测，片段分析， SSR/STR分型， 基因检测， 菌种鉴定， 线粒体测序， 基因组测序， 跑板等服务。
 
  平台优势  

质量稳定：精确读长达800bp以上，有效读长度超过900bp
准确度高：QV20+和CRL值>1000
时效性强：日均处理量>2000个反应，结果及时、准确
困难模板：成熟的方案应对High GC，AT rich，发夹结构，重复序列
一站式服务：基因组提取、引物设计、PCR扩增、Primer Walking、测序及结果分析

  技术流程  
 

  送样要求  

菌液和平板

需过夜培养的菌液，至少提供200ul；无需培养的，提供2-4ml过夜培养的菌液；

样品注明抗性，常备抗生素：氨苄青霉素(Amp)、卡那霉素(Kan)、氯霉素(Chl)；

若菌液所含质粒为超低拷贝，请直接提供质粒；

除大肠杆菌以外的菌液，请直接提供质粒。

   
质粒

浓度>50ng/ul，总体积不少于10ul；

请确保质粒溶解于灭菌的双蒸水中，TE溶解的质粒会造成反应失败。

   
PCR产物

已纯化PCR产物：

请确保DNA溶解于灭菌的双蒸水中，浓度>30ng/ul，总体积不少于20ul。

未纯化PCR产物：

请注明片段长度，条带是否单一，原液总体积不少于20ul；
片段<100bp建议克隆后测序；片段>4kb 建议分段扩增后测序。
 
测序引物

浓度≥5pmol/ul，总体积不少于10ul，并确保溶解于灭菌的双蒸水中；

测序引物长度尽量控制在20-30bp，引物过短或过长均会影响测序质量；

荧光标记或修饰的引物不适用于测序。

  订单填写及注意事项  
 

样品登记表需按要求填写详细，避免问题订单带来的实验延误；

确保样品名称与登记表名称一致，可包含“字母”、“数字”、“—”；请避免出现 汉字、拉丁字母及其他特殊字符；

填写“测通”的样品会默认拼接，“双向”测序的样品如需拼接请注明；

如样品为菌液或平板，请注明抗生素类型；

若测序引物不是通用引物，请自备或委托合成，选择引物类型（通用/新送/已送/需合成）并注明浓度；

若送测质粒不是常用载体，通用引物请写明引物全称；

未纯化PCR产物若已检测为单一条带，请在订单中注明，可大大提高测序成功率；

存在特殊结构的，如：High GC、AT rich、重复序列、发夹结构请在订单上备注；

大量样品送测时，请使用电子订单，方便核对且不易出错。

 
  交付结果  

交付形式：
电子邮件发送（请确保邮件地址填写无误并添加邮件地址白名单）；
客户登录《艾基生物订单查询系统》自行查询进度和下载结果。

报告内容：
一份.ab1 格式的峰型彩图：chromas 或者 FinchTV 免费软件打开；
一份.seq 格式的序列文件：文本文档或常用生物软件打开；
*如需拼接的会提供一份.txt格式的拼接结果。

  服务价格  
 

样品类型提取/纯化方式价格（个/反应）菌液试剂盒提取￥22.00质粒/￥20.00PCR已纯化/￥20.00未纯化切胶回收，磁珠/过膜纯化￥22.00

艾基生物广州实验室目前有两台ABI 3730xl 高通量DNA测序仪， 配备50cm毛细管、高分辨率液态分离胶，可提供稳定、高质量的跑板服务。
常规测序跑板：500元/板。
SSR跑板：650元/板
可检测以下两组荧光组合：
I ：FAM（蓝），HEX（绿），TAMRA（黄）,ROX（红），LIZ（橙）
II ：FAM（蓝），VIC（绿），NED（黄），PET（红），SIZ(橙)
其中LIZ，SIZ为内标。
 

  样品保存  

引物（100 pmol/ul）保存1个月，菌液，质粒，PCR产物保存2周。