1、 蛋白原核表达

博雅生物拥有在大型生物医药公司专门表达重组蛋白药物多年经验的蛋白表达专家，能解决原核蛋白表达过程中的多种瓶颈问题。博雅生物已经完成客户委托表达的蛋白达数百种之多。博雅生物有信心、有能力为客户提供蛋白外包服务和相关的药物研发支持。

博雅生物通过对市场的精心分析，为了满足客户（例如医药研发企业和一般研究者）的不同需求，特推出多种蛋白表达服务套餐，客户可以从中选择出适合自己需求的服务。客户也可根据自己的需求与我们共同探讨客户所需目的蛋白表达的技术路线和可行性，在质和量上满足客户要求的同时，为客户制定更加经济快捷的蛋白表达方案。

服务内容：

1、 客户提供cDNA序列（或者含目的基因片段的质粒）和实验目的，由我们选择和设计最优的实验方案和确定最适的纯化介质；

2、 客户提供已构建的原核表达菌株及相关资料，我们利用公司成熟稳定的蛋白纯化系统进行表达条件优化并纯化目标蛋白；

3、 原核蛋白表达及纯化小试，适合硕博士论文、职称论文等科研研究者或新药开发的前期研究者，主要是以获得蛋白蛋白表达和纯化条件及少量纯化蛋白用于后续的小动物或者细胞水平的实验；

4、 大量蛋白制备服务：适合工业化及对蛋白量需求大的客户。

服务特色：

1、 纯化介质丰富多样，能提供GST纯化（例如pGEX系列载体），His标签纯化（例如pET系列、pQE系列载体）、MBP标签纯化（例如pTwin-1等）等纯化介质；

2、 我们具有先进的蛋白纯化仪器设备，如AKTA蛋白纯化分析系统等；

3、 利用标签纯化，获得的蛋白纯度高：如带his/GST标签蛋白纯度≥95%；

4、 既能给客户提供可溶性蛋白的纯化，也能提供包涵体蛋白的纯化，且提供的是有活性的蛋白。

服务价格及服务周期

服务编号

服务项目

服务价格

服务周期

S2001-1

His蛋白的表达及检测

4000

2-3周

S2001-2

GST蛋白的表达及检测

4000

2-3周

S2001-3

MBP蛋白的表达及检测

5000

2-3周

客户须知：

1、 默认情况下，客户提供原核表达质粒和克隆到表达菌株中的甘油菌，我们负责表达蛋白和进行初步纯化；如果需要合成基因以及构建载体参见相关部分。

2、 默认情况下，纯化的蛋白为1-2mg左右，如需要更多量的蛋白，则询问技术人员。

3、 客户应确保所提供的实验材料即基因模板或表达质粒的正确性。

4、 如基因模板或表达质粒本身具有碱基突变，由此造成的实验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。

服务承诺：

1、 给您提供包含蛋白表达质粒的菌株和质粒各一份；

2、 诱导蛋白表达的条件：如IPTG浓度和温度等；

3、 足够量的纯化蛋白供您用于后续实验；

4、 提供详细的实验步骤、质粒鉴定的琼脂糖凝胶电泳图，蛋白表达和纯化的SDS-PAGE图，western-bloting图。

使用实例：

1、 收到客户寄过来带cox基因的甘油菌，摇菌，提取质粒，BamHI/SalI双酶切该质粒和Pet28a(+)载体（免费提供），回收，纯化，连接，转化，摇菌，PCR鉴定和质粒酶切鉴定，成功获得含目的基因的pet28a(+)原核表达载体（服务费用1200元）——实际耗时5个工作日；

2、 对IPTG诱导浓度、诱导温度、诱导时间等表达条件进行摸索，并对诱导菌进行水煮后进行SDS-PAGE分析，得出最佳诱导条件（服务费用为1000元）——实际耗时5个工作日；

3、 按照摸索出来的诱导条件对蛋白进行诱导，超声破菌，SDS-PAGE分析蛋白的表达形式，可溶性表达或者包涵体，然后对蛋白进行His柱纯化，（服务费用：可溶性纯化，2500元/1-2mg；包涵体纯化，3500元/1-2mg）——包涵体，实际耗时8个工作日；

4、 对蛋白进行western-blotting分析蛋白活性（服务费用：His抗体，1000元/蛋白；特异性抗体，一抗客户提供，1200元/蛋白）——实际耗时3个工作日；

5、对蛋白进行细胞水平的研究，根据具体情况再分析（略）。