技术服务介绍

       ELISPOT 全名为Enzyme-linked Immunospot Assay，其技术原理与ELISA相似。其实验设计是在96微孔培养盘底部披覆PVDF薄膜，用来吸附特殊挑选、且无毒性（不含sodium azide、内毒素endotoxin）的单株抗体。静脉血PBMC细胞经适当分离处理后，会被分配到微孔盘上，再接受适当的抗原刺激，并将微孔盘放置于温箱中过夜培养一段时间。一般而言，记忆型T细胞在受抗原刺激数小时后会开始分泌细胞激素，此时局部(在紧靠分泌细胞的周围)分泌出的细胞激素会被PVDF薄膜上特异抗体捕获。微孔盘中的细胞被移除并清洗后，被捕获的细胞激素可进一步使用生物素（Biotin）标记的二次抗体来标志，其后再以结合酵素的StreptAvidin与之作用，并加入酵素受质使其呈色，有反应作用的细胞会留下约10-20mm大小染色的斑点。

技术服务内容

服务内容

结果内容

备注

ELISPOT检测

实验步骤，斑点图，结果分析

客户需提供ELISPOT检测试剂盒

客户须知 

    1.样本要求：液态类标本（细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑积液等）保存

    2.样本量：每个样本收集体积=150µL*检测指标数。

    3.样本保存：请尽早保存，2-8℃保存一天。如需更长时间必须冷冻（-20℃或-70℃)保存

实验周期

    20个工作日内（具体实验周期视实验方案而异）