1 试剂、耗材
KM小鼠,注射器,剪刀,镊子(细),培养皿,生理盐水,孕马激素(PMSG),HCG(人用绒毛促性腺激素),透明质酸酶(消化作用,促扩散)。
2 仪器
体视镜,超净台
3 步骤
1. 选取5-6周龄的健康雌鼠,正常饲养1周;
2.下午4-5点,小鼠腹腔注射孕马激素1ml(5单位/ml);
3.48h后,小鼠再注射HCG 1ml(5单位/ml),然后再放雄鼠同笼;雌雄比例为2:1;
4.第二天早上(隔15-18小时),取雌鼠,转到超净台中;
5.麻醉后,剪开腹腔,暴露子宫,取出输卵管,放到有生理盐水的培养皿中;
6.在体视镜下剥去脂肪组织,用生理盐水洗3次,在盘曲状的输卵管上面找到透明膨大的部分,用解剖针挑破透明膨大的部分,游离多个受精卵细胞;
备注:注射了PMSG和HCG之后,大约在12h后发生排卵,4h左右排出被卵细胞包围在输卵管的透明膨大部分。