基因鼠繁殖
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基因鼠繁殖

产品属性

  • 品牌拓普生物
  • 产地深圳
  • 型号基因鼠繁殖
  • 关注度13
  • 信息完整度
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产品描述

       基因鼠身价昂贵,如果没有严格的饲养环境要求和专业饲养、繁殖技术,容易导致基因鼠不符合实验要求甚至死亡。深圳拓普生物在南山区建有1000平方的研发中心和300多平米的实验动物中心。可提供基因鼠饲养、繁殖等服务。

       大多数基因编辑小鼠相对野生型小鼠而言,机体功能可能会有所改变,例如成活率低、生殖率低,寿命短等,应尽快对基因编辑小鼠进行扩群繁殖。
 



基因鼠饲养应注意的问题
1 不同品系鼠生活习性、饲养要求和繁殖特点不一样,如C57BL/6J,该品系的雄鼠好斗,尤其是刚断奶后不同窝的雄鼠不宜放一笼饲养。
2 应尽可能地给小鼠提供适宜的生活环境和营养,这方面可参照国家标准来进行饲养管理。比如,小鼠对于噪音、光照比较敏感,所以我们应该尽量给小鼠提供安静的环境,尽量选在人员走动少的地方,也不要频繁查看小鼠情况,这样小鼠会有压力的。母鼠有筑巢的天性,可以向笼中放柔软的棉垫,鼓励其筑巢,有助于提高产量。

基因鼠繁殖流程
1 基于ES打靶技术构建的基因编辑小鼠
(1)完全性基因敲除小鼠与基因敲入小鼠
① 去除抗性基因Neo:选择阳性TurboKnockout小鼠(F0代)与野生型小鼠杂交,获得去除打靶载体中的Neo基因的F1代杂合子KO(+/-);若是传统的ES打靶技术构建的F0代阳性基因敲除小鼠,则需先与Flp小鼠交配删除Neo基因,再与野生型小鼠交配去Flp。
② 再从F1代中选一对杂合子KO小鼠进行自交,理论上可获得25%纯合的KO小鼠(-/-),50%的杂合KO(+/-)小鼠,25%的野生型小鼠。



基因敲入小鼠的建系流程与基因敲除小鼠的一样。
 
(2)条件性基因敲除小鼠
 ① 与Cre小鼠杂交:TurboKnockout-floxed小鼠与组织特异性的Cre小鼠杂交,获得去除Neo抗性且单条染色体有缺失的阳性F1代组织特异性cKO杂合子小鼠(+/-);若是传统的ES打靶技术构建的,则需先与Flp小鼠交配删除Neo基因,再与野生型小鼠交配去Flp。
 
② 再从F1代中选一对杂合子cKO小鼠进行自交,理论上可获得25%纯合的KO小鼠(-/-),50%的杂合KO(+/-)小鼠,25%的野生型小鼠。


2 基于CRISPR/Cas9技术的基因编辑小鼠
(1)完全性基因敲除小鼠与基因敲入小鼠 
① 测序鉴定选出阳性的F0代小鼠,与野生型小鼠进行交配,PCR鉴定(片段敲除只需PCR,移码突变还需测序)选出F1代阳性杂合小鼠。
② 选择来自同一只F0代小鼠,基因型一致的F1代小鼠,达到性成熟后互配,可获得F2代小鼠。对获得的F2代小鼠进行PCR及测序鉴定,理论上,F2代小鼠中25%为纯合子,50%为杂合子,25%为野生小鼠。


基因敲入小鼠的建系流程与基因敲除小鼠的一样。

(2)条件性基因敲除小鼠
① 与野生型小鼠杂交:阳性CRISPR-Pro小鼠与野生型小鼠(+/+)杂交,获得F1代杂合子小鼠(+/flox)。
② F1代杂合子小鼠(+/flox)进行自交,理论上可获得25%的纯合cKO小鼠(flox/flox),50%的杂合cKO小鼠(+/flox),25%的野生型小鼠。


深圳市拓普生物科技有限公司

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