免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
主要实验步骤如下:
1.蛋白质抽提;
2. 蛋白质定量;
3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE);
4. 蛋白质转移到***纤维膜或PVDF膜,按Bio-Rad蛋白转移装置说明组装滤纸凝胶纤维素夹层,30mA恒流条件下,4°C转移过夜;
5. 膜的封闭和抗体孵育;
6. 结果检测 ;
7. 数据分析;
8. 提供实验报告,包括详细的实验方法及免疫印迹实验结果的相关图表。
1.1原理 Western Blot印迹法是把通过电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至一种固相支持 物上,通过抗体与附着于固相支持物的靶蛋白的抗原表位发生特异性反应进行检测。 Western Blot既可以定性,又可以半定量,是初步鉴定靶蛋白表达的zei方便也是zei通用 的方法。
2)特点 ● 分辨率高,采用SDS-PAGE变性电泳 ● 灵敏度高,可检测到ng级 ● 准确性高,通过与内参蛋白比较对靶蛋白进行相对含量 3)实验流程(本公司采用湿转法)
公司具有严格的QC标准化操作流程,提供保质保量的生物服务。