细胞凋亡/增值检测
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细胞凋亡/增值检测

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MTT比色法能定量检测细胞的增殖与生长。已经在生物学和医学的许多研究领域中用于检测细胞毒性、细胞活性和细胞增殖试验

细胞增殖实验流程:
1、每孔加入100微升2000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素决定)。
2、每孔加入10微升CCK-8溶液。用加了相应量细胞培养液和CCK-8溶液但没有加入细胞的孔作为空白对照。
3、在细胞培养箱内继续孵育孵育1小时。
4、用酶标仪在450nm测定吸光度。

细胞凋亡实验流程:
采用传统Annexin V-FITC 结合检测法,
1. 调整细胞密度到大约1×106 细胞/ml。
2. 将0.5 ml 细胞悬液从细胞培养瓶中(5×105 个细胞)转移到一个干净的离心管内。
3. 室温1000×g 离心5 分钟,去除培养基。
4. 将细胞用0.5 ml 预冷的PBS 溶液轻轻重悬。
5. 室温1000×g 离心5 分钟,去除PBS 溶液。
6. 将细胞用0.5 ml 预冷的1×结合缓冲液轻轻重悬。
7. 加入1.25 μl Annexin V-FITC。
8. 室温(18-24°C)避光反应15 分钟。
9. 室温1000×g 离心5 分钟,去除上清。
10. 将细胞用0.5 ml 预冷的1×结合缓冲液轻轻重悬。
11. 加入10 μl Propidium Iodide。
12. 将样本放置在冰上避光保存。
13. 立即用流式细胞仪检测分析。

上海英拜生物科技有限公司

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