基因组编辑工具----CRISPR/Cas9系统

CRISPR/ Cas9 （Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）是zei近几年兴起用于靶向基因特定DNA修饰的重要工具。CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。细菌在CRISPR和Cas9的帮助下，可以经由小RNA分子的引导，靶标和沉默入侵者遗传信息的关键部分。在该系统中，crRNA（CRISPR-derived RNA）与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成的复合物能特异性识别靶基因序列，并引导Cas9核酸内切酶在靶定位点剪切双链DNA，随后，细胞的非同源末端连接修复机制（NHEJ）重新连接断裂处的基因组DNA，并引入插入或缺失突变。我们也可以提供一个外源双链供体DNA片段（Donor）通过同源重组（HR）整合进断裂处的基因组。从而达到对基因组DNA进行修饰的目的。目前，CRISPR-Cas9系统的高效基因组编辑功能已被应用于多种模式生物，包括人、小鼠、大鼠、斑马鱼、秀丽隐杆线虫、植物及细菌。