抗体制备流程
单克隆抗体制备流程
时间(天) |
制备步骤 |
说明 |
1 |
收到客户提供的抗原 |
开始制备抗体 |
2 |
SDS-PAGE检测抗原 |
检测蛋白分子量大小、纯度和浓度 |
4 |
第一次免疫 |
抗原+弗氏完全佐剂 |
18 |
第二次免疫 |
抗原+弗氏不完全佐剂 |
32 |
第三次免疫 |
抗原+弗氏不完全佐剂 |
38 |
采血ELISA检测效价(多抗制备完成) |
如果效价>10,000,准备融合;如果效价<10,000, 继续第四次免疫 |
40 |
加强免疫 |
单独抗原 |
45 |
细胞融合 |
SP2/0细胞与小鼠脾细胞融合 |
55-85 |
细胞筛选 |
筛选阳性克隆并进行亚克隆 |
90 |
细胞冻存 |
每种抗原提供3株杂交瘤细胞 |
90-110 |
制备腹水并纯化 |
制备腹水并用Protein A/G 纯化 |
120 |
zei终提供 |
3株杂交瘤细胞和相应Protein A/G 纯化的抗体5mg; 完整的技术服务报告; |