iTRAQ和TMT技术是近年来定量蛋白质组学最常用的高通量筛选技术，可用于筛选样本组之间的差异表达蛋白质，结合生物信息学分析，揭示差异表达蛋白质的生理病理功能。iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）技术是由AB SCIEX公司研发的一种体外同位素标记的相对与绝对定量技术，该试剂标记在多肽N末端或赖氨酸侧链基团，可一次性标记8种样本。TMT是由Thermo公司研发的同位素标记试剂盒，标记原理跟iTRAQ类似，但一次性可标记10个样本。肽段标记混合后，利用液质联用Orbitrap质谱仪Thermo Lumos ETD(50万分辨率，目前世界最高）/Thermo HF-X（24万分辨率）对蛋白质同时进行定性和定量分析，数据的优劣跟质谱性能的先进性密切相关。

      iTRAQ和TMT技术应用范围几乎涵盖所有学科，只要涉及蛋白质均可，例如细胞、组织、血液、唾液、植物、腹水、脑脊液等等。

定量蛋白质组学的一般流程为：

样本蛋白质提取---蛋白质纯化---蛋白质定量（100ug标记量）---蛋白质还原烷基化---蛋白质酶解----iTRAQ/TMT标记---样本混合冻干---LC-MS/MS质谱鉴定---生物信息学分析（GO、KGEE和String分析）---差异确证（WB、ELISA、PRM）---差异蛋白质功能研究（借助细胞/动物模型，例如过表达蛋白质或者小分子干扰蛋白质研究差异蛋白的功能）。

       本中心作为广东省第一家专业的蛋白质组学研究中心，也是广东省蛋白质组学转化医学重点实验室，开展此技术方法已经数年，积累了较为丰富的实践经验，发表文章见附件。本中心协助提供课题实验设计方案，客户只需提供蛋白样本，样品制备及其后续由本中心负责完成。本中心也可提供整体课题执行方案服务，具体可微信详聊LH417826085。