基本原理

1.替代瞬时表达载体使用；
2.lentivirus-shRNA/miRNA经慢病毒包装，转染（难于转染的细胞系）如原代/悬浮/处于非分裂的细胞，整合到受感染细胞的基因组,长时间稳定表达miRNA。

服务流程

1.客户提供：表达miRNA/shRNA的质粒（提供测序图谱）或者所要Konckdown的靶基因的名称、序列；所需的病毒滴度及总量、病毒是否需要纯化；若需要检测靶基因的表达变化，如需要请提供相应的抗体。

2.含目的基因的慢病毒RNAi干扰载体的构建和纯化提取；

3.慢病毒干扰载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染293T细胞；

4.培养48-72小时，收集上清；

5.病毒的纯化和浓缩；

6.滴度测定、目的基因鉴定；

7.将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞，筛选混合稳定细胞株，并检测靶基因的表达；

8.我们提供：重组后的慢病毒载体质粒，并附上PCR鉴定结果；提供已测定的滴度、可以直接进行后续分析的慢病毒储存液。

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