亚细胞定位技术服务

 

1、实验介绍：将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合，通过瞬时转化技术或者遗传转化技术，使得该融合蛋白在受体材料细胞内表达，目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器，通过观察荧光蛋白在细胞内显示的位置，确定目标蛋白的位置，从而确定目标蛋白的亚细胞定位情况。

 

2、实验用途：因为蛋白的功能和位置是对应的，例如一个光合作用相关的蛋白一定要定位在叶绿体内，所以通过亚细胞定位研究可以进一步佐证出目标蛋白的功能。

 

3、实验流程：实验细节沟通——订单/实验材料确认，签订合同——全基因合成或者基因克隆(如果客户未提供测序完成的目标基因)——实验设计——过表达载体构建——遗传转化/瞬时转化——激光共聚焦观察拍摄照片亚细胞定位（后两步为可选项）

   

4、客户需要提供的信息：

4.1、目标基因ORF

4.2、基因名称等注释信息，如果特别要求请在备注中注明。

4.3、如果不是我公司代为构建载体，客户需提供质粒（质粒浓度为>200ng/ul）以及菌液各一份。注明菌液抗性，荧光蛋白的颜色或者激发光和发射光波长。亚细胞定位

 

5、服务内容：亚细胞定位技术服务内容包括，基因克隆、载体构建与验证、农杆菌转化、转染、共聚焦显微镜观察拍照。各项目可整体检测也可单独检测。客户提供质粒，质粒图谱、转基因植株或者种子均可。

 

6、客户须知：激光共聚焦显微镜观察拍照。我们提供4倍，10倍，20倍，40倍的照片可选。客户需要确认拍照的倍数，每个倍数提供3张照片：荧光亚细胞定位图，DIC图和Merge图。

 

7、实验结果

   7.1、构建好的载体的图谱、全序列和注释信息；

   7.2、构建部位的测序结果；

   7.3、构建好的载体及其保存菌株（可选）；

   7.4.、亚细胞定位激光共聚焦整理图片和原始图片（可选项）。

 

图1. 拟南芥根中亚细胞定位图。