实时荧光定量 PCR (real-time PCR) 技术是在 PCR 反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个 PCR 进程，zei后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。用于候选基因或候选的 microRNA 表达水平的定量分析。RNA 提取、反转录 cDNA 第一链、引物设计与合成可由本平台完成，也可由测试方完成并提供高质量的 cDNA 和扩增引物。

❀服务内容

1. 抽提样品 DNA 或 RNA，分为细胞样品和组织样本；

2. 引物/TaqMan 探针设计与合成，分为探针法和染料法；

3. Real time 反应；

4. 预实验：荧光 PCR 体系优化；

5. 标准曲线制作，相对定量（不需），绝对定量（需要）；

6. 荧光 PCR 检测，结果分析及实验报告。

❀应用

1. 起始模板的测定；

2. 基因型的分析；

3. 融解曲线分析：可以优化 PCR 反应的条件，对常规 PCR 有指导意义，如对 primer 的评价；可以区分单一引物、引物二聚体、变异产物、多种产物。