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Cell Counting Kit简称CCK试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝***基)-3-(4-硝***基)-5-(2,4-二磺基***)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-8属于MTT的升级产品,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲?产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。 CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。
★ 服务内容:
1、细胞培养。
2、CCK8检测。
★ 服务流程:
1、对数期细胞制备细胞悬液接种到96孔板中:根据合适的铺板细胞数,每孔约100ul细胞悬液;
2、37℃、5%CO2培养箱中培养24h;
3、分别加入待检测的毒性物质,每个处理可设置3-5复孔,同时设置空白和正常对照;
4、37℃培养箱中继续培养:根据毒性物质的性质和细胞的敏感性调整处理时间;
6、每孔加入10ul CCK8试剂,继续培养1-4小时;
7、在450nm波长处测定吸光度:建议采用双波长进行测定,检测波长450-490nm,参比波长600-650nm;
8、数据分析。
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