微生物限度检测仪CYW-300B技术参数：

1、适用滤膜直径：Φ47mm/50mm；

2、有效过滤直径：40mm；

3、滤杯容量:100ML；

4、过滤头数量：3；

5、检测方法：薄膜过滤法；

6、抽滤方式：隔膜泵负压抽滤，无需抽气瓶；

7、抽液速率：100ml/15s；

8、过滤头灭菌方式：湿热灭菌、火焰枪快速灭菌；

9、滤头：可拆装。

微生物限度检查方法(薄膜过滤法)验证方案

微生物限度检查方法(薄膜过滤法)验证方案编码：

表一、验证方案的起草与批准

1.验证方案起草

起草人：起草时期：年月日

2.验证小组成员：

3.验证方案审核

4.验证方案批准

批准人：批准日期：

微生物限度检测仪CYW-300B

验证方案

1.验证目的和原理

1.1验证目的为确认所采用的方法适合于该药品的细菌、霉菌、酵母菌数的测定，特制定本方案。验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需要变更时，应报验证委员会批准。

1.2原理通过比较试验4组中试验菌的恢复生长结果来评价整个检验方法的准确性、有效性和重现性。

2.验证方法步骤

2.1验证前的准备：进行微生物限度检查方法（薄膜过滤法）验证前，所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。试验菌应包括G—、G+、酵母菌和霉菌类微生物以基本覆盖样品中可能存在的微生物。

2.2验证试验的操作计划：用3个不同批号产品微生物限度检测方法进行平行试验，通过计算回收率来判断限度检查方法是否对产品有影响。

2.3试验结果可接受标准：用标准菌株评价方法“”的微生物限度检查对检品中微生物的抑制性，试验结果应显示3次独立的平行试验中，稀释剂对照组的菌回收率应不小于70%，试验组回收率也不低于70%。

3.试验实施

3.1试验前的准备

3.1.1主要仪器设备：恒温培养箱、生化培养箱、电子天平、高压蒸汽灭菌器、净化工作台。

3.1.2操作环境：操作间应该安装空气除菌过滤层装置。环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。操作间或净化工作台的洁净空气应该保持对环境形成正压，不低于4.9pa。

3.1.3试验样品：批号：批号：批号：

3.1.4培养基：

3.1.5稀释液：PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液以上经115℃高压蒸汽灭菌30min。

3.1.6验证用微生物名称及其编号

微生物限度检测仪CYW-300B实验菌株的来源：编号由菌名首字母—传代代数—制备日期组成。

3.1.7器具：无菌薄膜过滤器：（孔径0.45um直径50mm）、无菌移液管（5ml）

4.验证方法

4.1菌液的制备将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌接种至10ml的无菌营养肉汤中在30～35℃下培养18～24小时，将白色念珠菌接种至改良马丁液体培养基中，在23～28℃下培养24～48小时。将黑曲霉接种至改良马丁液体培养基中，在23～28℃下培养5～7天。将上述培养物用0.9%的无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌落数为50～100cfu的菌悬液。

4.2实验方法供试液的制备：取样品10g（ml）加入无菌PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇使分散均匀□，用匀浆仪混匀□，置45℃水浴使胶囊壳溶化混匀□，制成1：10均匀的供试液

微生物限度检测仪CYW-300B使用说明和注意事项

微生物薄膜过滤器,微生物限度检测仪使用说明和注意事项：

微生物限度检测仪使用说明：  实验准备：取硅胶管一根，将一端套在过滤装置的出液口，另一端套在收集瓶的进液口（不锈嘴）；再取另一根硅胶管，一端套在收集瓶的抽气端（白色塑料嘴），另一端通过不锈钢宝塔接头与真空泵相连1、试验前，应先将滤杯清洗干净、晾干、取滤膜(50mm)侵泡到纯化水里3~5min，滤杯及滤膜支撑网消毒备用（可采用火焰灭菌器快速消毒）。 

2、用镊子夹住滤膜放在抽滤装置的滤网上。

3、将其供试品注入过滤杯内，然后启动真空泵，再打开相应阀门，实施过滤集菌。 

4、供试品过滤集菌结束后(滤膜上没有水珠)，关闭真空泵开关，用无菌镊子取出密封圈，在用无菌镊子取出滤膜。

5、将滤膜贴到事先准备好的培养基上，菌面朝上，平贴，不得有气泡。相应的液体培养基注入滤杯内，培养基覆盖滤膜表面即可。

6、盖上盖子放置在生化培养箱及恒温培养箱中，按规定温度和时间进行培养，逐日观察、计数。

7、仪器正常性检测:取600ml~1200ml纯化水，每个滤杯注入100ml纯化水,接通真空泵电源，再分别打开相对应的阀门，实施抽滤(抽滤时间1~5min为正常范围)，根据速度将准备好的纯化水加入滤杯中，纯水顺畅地从排液口流出，即视为仪器可正常工作,如果过滤速度过慢或无法过滤，请检查: A.管路连接是否漏气，滤杯密封性是否良好；B.检品是否含有较多不溶性的颗粒，悬浮物等；  C.检查不锈钢网片是否堵塞，不锈钢底座出液孔是否堵塞将以下HTML内容重写，意思相近，表述不同，使用中文，换行使用
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若有其他问题，请与厂家联系。

8、清洗:仪器长期未使用时，再次使用前需对仪器管路进行消毒。可选择以下消毒剂：A乙醇、B新洁尔灭、C甲醛、D次氯酸溶液。

消毒方法：准备100ml消毒剂和200ml无菌水（不需微孔滤膜）。先过滤100ml消毒剂，保持3~5分钟，再过滤200ml无菌水，完成管路消毒。

微生物限度检测仪注意事项：

1. 根据供试品性质选择滤膜材质，过滤前后确保滤膜完整；

2. 仪器不使用时，请断电；

3. 切勿过滤强酸、强碱、强氧化剂、强腐蚀液体；

4. 如供试品中有不溶性颗粒或悬浮物，可能导致滤膜堵塞，影响过滤。需预处理去除颗粒或悬浮物；

5. 抽滤前，确保管道密封良好。